TOSOH

此款色譜柱能夠根據(jù)抗體與FcγRⅢa受體的親和力來分離抗體。與傳統(tǒng)的表面等離子體共振(SPR) 方法相比，TSKgelFcR-IIIA-NPR對曲妥珠單抗的FcγRⅢa親和力變化表現(xiàn)出更高的敏感性，證明了這項(xiàng)新技術(shù)在生物相似性評估中的強(qiáng)大作用。

通過近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，抗體Fc區(qū)的N-糖鏈結(jié)構(gòu)會影響抗體與Fc受體之間的親和力，與Fc受體親和力強(qiáng)的抗體，其細(xì)胞殺傷力即ADCC活性也越高，能增強(qiáng)****的活性。根據(jù)這一機(jī)制原理，東曹公司將Fc受體之一的重組FcγRⅢA作為配基，鍵合到非多孔親水性聚合物基質(zhì)的填料上，并充填至PEEK色譜柱內(nèi)，開發(fā)出了TSKgelFcR-ⅢA-NPR色譜柱，它給分析抗體糖鏈結(jié)構(gòu)、測定ADCC活性提供了一種全新的方法。

FcR色譜柱的應(yīng)用實(shí)例

下圖是使用TSKgelFcR-ⅢA-NPR色譜柱對利妥昔單抗類似藥和原研藥進(jìn)行比對分析的色譜圖。洗脫峰面積比例的不同顯示出了生物類似藥和原研藥在糖鏈結(jié)構(gòu)和活性上存在差異。

此外，TSKgelFcR-ⅢA-NPR色譜柱也可用于抗體**質(zhì)量控制中批次差的檢驗(yàn)。將兩個批次的**性抗體**A注入色譜柱中進(jìn)行分析后，通過比對峰面積百分比的差異可以更加快速簡便地發(fā)現(xiàn)**質(zhì)量的批間差。

幾種抗體生物活性分析方法的比較

目前為止，傳統(tǒng)的抗體活性檢測方法主要有細(xì)胞ELISA法或SPR等手段，不僅需要昂貴的設(shè)備及繁瑣的操作，且實(shí)驗(yàn)成本高耗時較長。使用TSKgelFcR-ⅢA-NPR色譜柱能非常簡便地獲得重復(fù)性良好的分析結(jié)果，且分析成本更低。下表中，我們列舉了幾種常用的ADCC活性和糖鏈分析方法的比較。

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