UP-SW3000
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
TSKgel UP-SW3000 色譜柱采用粒徑為2 μm,鍵合了二醇基的硅膠顆粒充填。是一款用于生物大分子分離用的尺寸排阻色譜分析柱。填料粒徑為2 μm,適合用于蛋白質(zhì)、抗體、酶等生物大分子的快速分析(15 cm 規(guī)格柱)以及高分辨率分析(30 cm 規(guī)格柱)。 與現(xiàn)有產(chǎn)品TSKgel SW系列色譜柱具有相同的填料表面特性。
產(chǎn)品詳細(xì)信息
TSK UP-SW3000色譜柱 HILIC柱
TSKgel UP-SW3000 色譜柱采用粒徑為2 μm,鍵合了二醇基的硅膠顆粒充填。是一款用于生物大分子分離用的尺寸排阻色譜分析柱。填料粒徑為2 μm,適合用于蛋白質(zhì)、抗體、酶等生物大分子的快速分析(15 cm 規(guī)格柱)以及高分辨率分析(30 cm 規(guī)格柱)。 與現(xiàn)有產(chǎn)品TSKgel SW系列色譜柱具有相同的填料表面特性。? 填料的特性(孔隙容量、校正曲線的斜率)與TSKgel G3000SWXL 相同,所以非常適合用來分離抗體(IgG)的二聚體、單體、抗體片段。兩種色譜柱尺寸可供選擇:
? 4.6 mm I.D. x 15 cm 的規(guī)格可用于超高速的分離。
? 4.6 mmI.D. x 30 cm 的規(guī)格可用于超高分辨率的分析。
? 可同時(shí)兼容于UHPLC和HPLC系統(tǒng)
? 必須使用半微型液相系統(tǒng),即,較小死體積的液相系統(tǒng)才能實(shí)現(xiàn)較為理想的色譜柱性能。
(separate report *****6)抗體**中使用的單克隆抗體,在生產(chǎn)、貯藏或運(yùn)輸過程中可能會(huì)形成二聚體等凝聚物,存在引發(fā)**反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)因素,故在質(zhì)量控制中采用體積排阻色譜法(SEC)對(duì)單克隆抗體進(jìn)行分離分析?,F(xiàn)有的 TSKgel G3000SWXL 色譜柱常用于此用途,但仍需要更高分離度以及更短分析時(shí)間的SEC 分析技術(shù)?,F(xiàn)在 2μm 粒徑的高性能 SEC 色譜柱TSKgel UP-SW3000 已實(shí)現(xiàn)了商品化。在本報(bào)告中,介紹了 TSKgel UP-SW3000 色譜柱的基本特性及其分離實(shí)例。
TSKgel UP-SW3000 色譜柱的基本特性
填料的特性
表 1 所示為 TSKgel UP-SW3000 色譜柱的填料特性、色譜柱規(guī)格,以及與常用于抗體分離的現(xiàn)有 SW 型色譜柱的性能對(duì)比。TSKgel UP-SW3000 色譜柱是以 25nm 孔徑硅膠表面導(dǎo)入二醇基后形成的 2μm 微粒為填料的色譜柱。與現(xiàn)有 SW 型色譜柱相比,具有更高的分離性能,適用于抗體二聚體及單體的分離。
表 1:填料特性、色譜柱規(guī)格
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本色譜柱 |
現(xiàn)有色譜柱 |
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TSKgel UP-SW3000 |
Tskgel UltraSW Aggregate |
Tskgel SuperSW mAb HR |
Tskgel G3000Swxl |
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色譜柱尺寸 |
4.6*300mm |
4.6*150mm |
7.8*300mm |
7.8*300mm |
7.8*300mm |
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基質(zhì) |
硅膠 |
硅膠 |
硅膠 |
硅膠 |
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官能團(tuán) |
二醇基 |
二醇基 |
二醇基 |
二醇基 |
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粒徑 |
2um |
3um |
4um |
5um |
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孔徑 |
25nm |
30nm |
25nm |
25nm |
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分子量排阻范圍 |
800kDa |
2500kDa(推算) |
800kDa |
800kDa |
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分子量測(cè)定范圍 |
10-500kDa |
10-2000kda |
10-500kDa |
10-500kDa |
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用途 |
抗體(二聚體/單體/片段)的高效分離分析 |
抗體(二聚體/單體/片段)快速分析 |
抗體(多聚體)高效分離分析 |
抗體(二聚體/單體)高效分離分析 |
一般蛋白、抗體(二聚體/單體)的高效分離分析 |
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標(biāo)準(zhǔn)曲線和分離性能
使用 TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000(4μm)及 TSKgel G3000SWXL(5 μm)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的色譜圖對(duì)比如圖 1 所示,采用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)制成的校正曲線對(duì)比如圖 2 所示。具有相同孔徑特性的 TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000 及 TSKgel G3000SWXL 中,甲狀腺球蛋白的二聚體及多聚體不會(huì)滲入小孔內(nèi)而排出,進(jìn)入間隙體積(V0)(圖 1),校正曲線的斜率相同(圖 2)。表 2所示為樣品核糖核酸酶 A 的理論塔板數(shù)。粒徑較小的TSKgel UP-SW3000 比其他色譜柱的理論塔板數(shù)更高。圖 3 所示為使用 TSKgel UP-SW3000、TSKgel SuperSW3000、及 TSKgel G3000SWXL 分離單克隆抗體的色譜圖對(duì)比,表 3 所示為各溶出峰分離度(R)的對(duì)比。粒徑較小的 TSKgel UP-SW3000 比其他色譜柱的分離度更高。(separate report *****6)
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