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產品資料

赤點石斑魚神經壞死病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

赤點石斑魚神經壞死病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
  • 如果您對該產品感興趣的話,可以
  • 產品名稱:赤點石斑魚神經壞死病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
  • 產品型號:FS-01P98883
  • 產品展商:撫生
  • 產品文檔:無相關文檔
簡單介紹
赤點石斑魚神經壞死病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。
產品描述

操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

產品特點:

1、公司產品僅用于科研不需要單獨純化線粒體,柱式法純化,操作簡單快捷。

2、得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。

3、每107個動物細胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克組織一般能得到3~5μg mtDNA。

注意:本產品只適合于動物材料,不適合于植物材料,因為植物線粒體DNA一般都十分巨大,非常難提。

產品名稱

赤點石斑魚神經壞死病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

規(guī)格

50次

貨號

FS-01P98883

產品組成:

成分

規(guī)格

溶液A

13ml

溶液B

13ml

溶液C

18ml

離心吸附柱

50套

通用洗柱液

50ml

DNA洗脫液

10ml

說明書

1份


使用方法:

:培養(yǎng)細胞預處理

1. 用自備的0.25%胰酶消化液處理約107個培養(yǎng)細胞,離心收集后棄上清。

2. 用PBS或TBS等緩沖液洗滌細胞兩次,離心得到的細胞沉淀直接用于mtDNA提取。

:組織細胞預處理

3. 用剪刀將1g新鮮的動物組織剪碎(芝麻大小*),轉移到1.5mL塑料離心管中,用于mtDNA提取。注意:*不要使用凍存的動物組織,因為凍凝過程中形成的冰晶會將線粒體刺破,使其DNA釋放出來被胞漿中的DNA酶降解,影響回收率。

:血液預處理

4. 將3-5mL抗凝外周血靜置30分鐘或低速離心5分鐘,取白細胞層。

5. 用自備PBS洗滌白細胞兩次,得到的白細胞沉淀用于mtDNA提取。

柱式動物線粒體DNA提取試劑盒(PCR級)四:mtDNA提取

5.在細胞沉淀或剪碎的組織中加入250μL冰浴的溶液A,充分吹打分散。如果是剪碎的組織,不要等成塊的組織溶解即可繼續(xù)下步操作。

6. 加入250μL常溫的溶液B(如果溶液B有沉淀,用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用),溫和反復顛倒混勻10次。千萬不要劇烈振蕩。

7. 冰上放置6-8分鐘。注意不要超過8分鐘。

8. 加入350μL冰浴的溶液C,溫和混勻4-6次,可見白色沉淀物產生,然后放冰上放置20-25分鐘。

9.室溫12000~15000g離心10分鐘,小心將上清液轉移到離心吸附柱中。由于此時的溶液比重較大,有時候出現沉淀漂浮是正常現象,取上清時避開漂浮的沉淀即可。

10. 靜置5分鐘以讓DNA與離心吸附柱充分結合,此步十分重要。

11.室溫12000~15000g離心1分鐘,棄收集管中的廢液。

12. 加入500μL的通用洗柱液,室溫12000~15000g離心1分鐘,棄收集管中廢液。

注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要將蓋擰緊存放,否則乙醇會揮發(fā)。

13. 重復上步1次。

14.室溫12000~15000g離心1分鐘,甩干殘留液體。此步不能省略,否則殘留乙醇會影響DNA的后續(xù)使用(如DNA上樣時不能沉淀到加樣孔中)。

15. 將離心吸附柱置于一個新的1.5mL塑料離心管中,加入30-50μL 65-80℃預熱的DNA洗脫液,室溫放置2分鐘。常溫的DNA洗脫液也可以用于洗脫,但產量稍微有所降低。

16.室溫12000~15000g離心1分鐘,離心管底溶液即mtDNA。

17. 由于本公司離心吸附柱結合DNA能力較強,如果再加30-50μL DNA洗脫液到離心吸附柱中,往往還能洗脫下很多mtDNA(相當于次洗脫的20-30%),但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液來洗脫。

18. 12000~15000g離心1分鐘,離心管底溶液即線粒體DNA。每107個動物細胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克組織一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要濃縮,可以使用本公司的核酸濃縮劑。

19. 由于DNA機械斷裂,電泳時DNA可能不呈現專一的帶,但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。下列是公司正熱銷的產品:
組織糖原磷酸化酶b(GLYCOGEN PHOSPHORYLASE)活性10次γ-亞麻酸甲酯

酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒苦地丁

細胞磷酸二酯酶(50042.1)總活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒20次爵床

組織磷酸二酯酶(PDE)總活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒20次薏苡仁

血液磷酸二酯酶(PDE)總活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒20次秦皮

細胞磷酸二酯酶(PDE)總活性熒光定量檢測試劑盒20次野牡丹

組織磷酸二酯酶(PDE)總活性熒光定量檢測試劑盒20次6-巰基嘌呤

血液磷酸二酯酶(PDE)總活性熒光定量檢測試劑盒20次水楊酸鎂

細胞磷酸二酯酶1(PDE1)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒10次鹽酸維拉帕米

組織磷酸二酯酶1(PDE1)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒10次呋咱甲氫龍(夫拉扎勃)

血液磷酸二酯酶1(PDE1)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒10次己酮可可堿

細胞磷酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量檢測試劑盒10次鹽酸洛美利嗪

組織磷酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量檢測試劑盒10次硝呋太爾雜質B

血液磷酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量檢測試劑盒10次丙戊酸鎂

細胞磷酸二酯酶2(PDE2)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒10次粉萆薢探針法PCR鑒定試劑盒
赤點石斑魚神經壞死病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒TGF-beta 2  轉移生長因子β2抗體二氟溴乙酸乙酯 97%

TGF beta 3  轉移生長因子β3抗體氫加蘭他敏 98%

TGF Beta R1/TGFBR1  轉移生長因子β受體1抗體二氫黃酮甙 97%

TGF beta R2/TGFBR2  轉移生長因子β受體2抗體半胱鹽酸鹽 98%

TGF Beta R3  轉移生長因子β受體3抗體鹽酸二氟沙星 分析標準品

TGM3  轉谷氨酰酶3抗體Α-D-五苯甲酸酰吡喃葡萄糖 98%

Thioster-containing protein 1  按蚊硫酯包含蛋白-1抗體4-甲基-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖苷 99%

ERdj5  ERdj5蛋白抗體對基-β-D-吡喃半乳糖苷 99%

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