商品屬性:
貨號
規(guī)格
產(chǎn)品名稱
A-PJ1059-1000U
1000U
TdT末端轉(zhuǎn)移酶(Terminal Transferase)
儲存條件:
TdT末端轉(zhuǎn)移酶(Terminal Transferase) 儲存:-20℃ 可保存 3 年。
產(chǎn)品介紹:
末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)是一種不依賴于模板的 DNA 聚合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到 DNA 分子的 3’羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈 DNA 分子均可作為 TdT 的底物,加尾長度可達(dá) 5~300nt。本酶經(jīng)電子重構(gòu)架技術(shù)篩選,使其可以在 45°C 高溫下反應(yīng),從而避免因 DNA 二級結(jié)構(gòu)造成的加尾效率下降。該酶廣泛用于 DNA 的 3’末端添加同聚物、利用修飾堿基(如 ddNTP,DIGdUTP)標(biāo)記DNA 3’末端、TdT 介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記技術(shù)(細(xì)胞凋亡的原位檢測)等試驗(yàn)。
活性定義
37 ℃ 60 分鐘內(nèi),催化 1nmol dNTP 加入到多聚核苷酸 3’羥基末端中所需的酶量定義為 1 個(gè)活性單位 熱失活:75°C 20min。
45°C 孵育 30min,本酶反應(yīng)溫度可在 37~45°C 之間調(diào)整, 45°C 條件下更利于末端暴露,從而利于加尾。 2. 75°C 20min 失活。 注意事項(xiàng):
1、適量 EDTA 可使 Terminal Transferase 的活性喪失。 2、金屬離子螯合劑,較高濃度的銨根離子、氯離子、碘例子和磷酸根離子均對 Terminal Transferase 活性具有抑制作用。 3、DNA 末端 mol 數(shù)的計(jì)算,長度為 100bp 的 DNA:1pmol末端 DNA=0.33ng。
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