公司來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提??相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。本產(chǎn)品僅能用于科研
產(chǎn)品名稱
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小鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
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規(guī)格
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詳見說明書
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貨號(hào)
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XG-0606763
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運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
培養(yǎng)方法:
收到后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況:
如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(達(dá)80-90%)。即可進(jìn)行傳代,具體步驟如下:
a,棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。
b,向瓶?jī)?nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞。
c,加入等量的的培養(yǎng)液,輕輕吹打混勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)
d,傳代比例:1:2-1:3
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM
EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
Dihydrotanshinone
I 87205-99-0 中文名: 分子式:C18H14O3 Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISA試劑盒人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tanshinone IIB
17397-93-2 中文名:丹參酮IIB 分子式:C19H18O4 組織N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Tanshinone I
568-73-0 中文名: 分子式:C18H12O3
humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit人0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Neoprzewaquinone A
630057-39-5 中文名: 分子式:C36H28O6 兔子球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Cryptotanshinone
35825-57-1 中文名:隱丹參酮 分子式:C19H20O3 People leils binding type AFP / AFP Varia 3
(AFP-L3) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒E
Pentachlorothiophenol,certified 標(biāo)準(zhǔn)品 Octrizole
133-49-3 純品型,100MG
五氯苯 標(biāo)準(zhǔn)品 Thiabendazole
608-93-5 純品型,0.5g
Pentabromophenol,certified 標(biāo)準(zhǔn)品 Oxcarbazepine 608-71-9 純品型,0.1G
1,3-丙二醇 標(biāo)準(zhǔn)品 Benfuracarb 504-63-2 純品型,0.25g
鹽酸丙氨卡布 L-Ornithinehydrochloride - 純品型,10mg
鹽酸百維威/霜霉威(鹽酸鹽) 標(biāo)準(zhǔn)品 Propamocarbhydrochloride 25606-41-1 純品型,0.1g
0μl比色皿4-Benzyl
N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate75368N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-芐酯
7ml圓底連蓋離心管0個(gè)/包 4-Biphenylcarboxylic acid9224-苯基苯甲酸
85ml圓底旋蓋高速離心管 PP個(gè)/包 N,N'-Bis(acetoacetyl)-o-toluidine916N,N'-雙(乙酰乙?;?span>)