ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。下面分析Elisa試驗(yàn)操作中加樣影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1、血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2、手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));
3、加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。 解決辦法:
1)、 標(biāo)本為血清:*好將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2)、加樣后及時(shí)放入孵箱。
3)、 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4)、 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,*好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5)、 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。