RT-PCR試劑盒

相對定量分析方法  ：
2-ΔΔCt
前提：目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
 1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值：
   ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
   ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
 2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
        ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
 3、計算表達水平比率：
                   2 –ΔΔCT=表達量的比值

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：RT-PCR試劑盒
貨號：BJ-205573

使用方法:

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

具有下列特點：
1.根據(jù) 指標的保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級，可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單，定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 μL、20
μL、200 μL、1000 μL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的**離心管、吸頭（10 μL、200 μL、1000 μL）、**雙蒸水。

醋酸西曲瑞克 Cetrorelix Acetate 120287-85-6 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
白屈菜紅堿 Chelerythrine 34316-15-9 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分析標準品
醋酸氯己定 Chlorhexidine Acatate 56-95-1 質(zhì)量規(guī)格：>98%
氟伐他汀鈉 Fluvastatin sodium salt 93957-55-2 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
氟伐他汀鈉(標準品) Fluvastatin sodium salt 93957-55-2 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
克林沙星 Clinafloxacin 105956-97-6 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
鹽酸**咪唑 Levamisole HCl 16595-80-5 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
鹽酸**咪唑（標準品） Levamisole HCl 16595-80-5 質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定
鹽酸氯米帕明/鹽酸氯丙咪嗪 Clomipramine HCL  17321-77-6 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
鹽酸氯米帕明/鹽酸氯丙咪嗪（標準品） Clomipramine HCL  17321-77-6 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
硫酸氫氯吡格雷 I型 Clopidogrel Bisulfate 120202-66-6 質(zhì)量規(guī)格：>98%,I型
硫酸氫氯吡格雷 II型(標準品) Clopidogrel Bisulfate 120202-66-6 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品
硫酸氫氯吡格雷 II型 Clopidogrel Bisulfate 120202-66-6 質(zhì)量規(guī)格：含量97.0%-101.5%，II型
萘丁美酮/萘普酮 Nabumetone 42924-53-8 質(zhì)量規(guī)格：>99%
萘丁美酮/萘普酮（標準品） Nabumetone 42924-53-8 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
地瑞拉韋 Darunavir 206361-99-1 質(zhì)量規(guī)格：>98%
沃氏物 Methoxydienone 2322-77-2 質(zhì)量規(guī)格：含量≥85%
DL-α-羥基戊二酸二鈉 DL-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt  40951-21-1 質(zhì)量規(guī)格：98%,GC,進分sigma 94577
地美溴胺 Demecarium Bromide  56-94-0 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
去氧孕烯 Desogestrel 54024-22-5 質(zhì)量規(guī)格：>98%
地索奈德  Desonide  638-94-8 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
甲磺酸加貝酯 Gabexate mesylate 56974-61-9 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)熒光測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
活體  氧化應(yīng)激活性氧（ROS）原位染色試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：100次
冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧（ROS）原位染色試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
活體  氧化應(yīng)激活性氧（ROS）原位比色法定量檢測試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：100次
  培養(yǎng)液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：100次
植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
活體  氧化應(yīng)激活性氧（ROS）原位熒光染色試劑盒（羥自由基） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧（ROS）原位熒光染色試劑盒（羥自由基） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
  氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（羥自由基） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
組織氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（羥自由基） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（羥自由基） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
酵母氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（羥自由基） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（羥自由基） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
  內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測定試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
RT-PCR試劑盒冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測定試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
  培養(yǎng)液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測定試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
**/酵母  內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測定試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測定試劑盒（超氧陰離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
  內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20/50次
冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
**/酵母氧化應(yīng)激活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

注意事項：
1. 建議使用新鮮采取的動物組織，若為長期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間，也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測時，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶，影響實驗結(jié)果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi)，以便擴增效率佳。
?5. 為了您的**和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

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