相對定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目標序列和內參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內
1、用內參基因的CT值歸一目標基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、計算表達水平比率：
2 –ΔΔCT=表達量的比值
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：PCR試劑盒
貨號：BJ-205575
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
具有下列特點：
1.根據(jù) 指標的保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級，可以達到幾百拷貝/反應。
3.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單，定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 μL、20
μL、200 μL、1000 μL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的**離心管、吸頭（10 μL、200 μL、1000 μL）、**雙蒸水。
**度酸(標準品) Etodolac 41340-25-4 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
**孕烯 Etonogestrel 54048-10-1 質量規(guī)格：>98%
依維莫司 Everolimus;RAD001 159351-69-6 質量規(guī)格：>95%,mTOR抑制劑,BR
醋酸氟輕松;醋酸膚輕松 Fluocinolone Acetonide 67-73-2 質量規(guī)格：>98%,BR
醋酸氟輕松;醋酸膚輕松(標準品) Fluocinolone Acetonide 67-73-2 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
馬來酸氟吡汀 Flupirtine maleate 75507-68-5 質量規(guī)格：>98%
馬來酸氟吡汀(標準品) Flupirtine maleate 75507-68-5 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
氟維司群 Fulvestrant 129453-61-8 質量規(guī)格：>99%,進分,ER(雌**受體)拮抗劑
孕二烯酮 Gestodene 60282-87-3 質量規(guī)格：>99%
孕二烯酮(標準品) Gestodene 60282-87-3 質量規(guī)格：>99%,標準品
海沙瑞林 Hexareline 140703-51-1 質量規(guī)格：>98%
伊潘立酮 Iloperidone 133454-47-4 質量規(guī)格：>98%,可用于 培養(yǎng)
伊潘立酮(標準品) Iloperidone 133454-47-4 質量規(guī)格：>98%,標準品
亞胺培南 Imipenem monohydrate 74431-23-5 質量規(guī)格：>98%,BR
亞胺培南（標準品） Imipenem monohydrate 74431-23-5 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
吲達帕胺 Indapamide 26807-65-8 質量規(guī)??：>99%,EP6.0,BR
吲達帕胺（標準品） Indapamide 26807-65-8 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
碘帕醇(標準品) Iopamidol 62883-00-5 質量規(guī)格：HPLC>98%,USP
碘帕醇 Iopamidol 62883-00-5 質量規(guī)格：>98%,USP
鹽酸洛哌丁胺 Loperamide HCl 34552-83-5 質量規(guī)格：>98%,BR
鹽酸洛哌丁胺(標準品) Loperamide HCl 34552-83-5 質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品精液組分氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
**/酵母 內氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
動物組織氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
植物氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
血液氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
體液氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
動物 氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
培養(yǎng)懸液氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
純化線粒體氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
精子 氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
PCR試劑盒精液組分氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
**/酵母 內氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
動物組織氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
植物氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次
純化線粒體氧化應激活性氧（ROS）高質熒光測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
純化線粒體氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
膜電位依賴性純化線粒體氧化應激活性氧（ROS）高質熒光測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應激活性氧（ROS）高質熒光測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次
注意事項：
1. 建議使用新鮮采取的動物組織，若為長期冷凍組織，應盡量避免反復凍融，否則會導致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間，也可在37℃水浴中預熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測時，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶，影響實驗結果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內，以便擴增效率佳。
?5. 為了您的**和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
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