在我們做生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)或者某些物理化學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí),為了更好地觀察到實(shí)驗(yàn)效果,通常會選用合理的染色劑,在選擇適當(dāng)?shù)娜旧珓┖?,我們就能夠很好地觀察到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或結(jié)果。染色劑依據(jù)來源可分為天然染色劑和人工合成染色劑,各種不同的實(shí)驗(yàn)選擇不同的染色劑,同一種染色劑也可以用不同的配方進(jìn)行調(diào)配制成?,F(xiàn)一起了解染色劑的化學(xué)性質(zhì)分類:
染色劑的干粉是穩(wěn)定的鹽類,它們在溶液中則電離成酸性或堿性染色劑。如酸性染色劑,能夠產(chǎn)生氫離子(H+)或其它陽離子(Na+),而其本身成為帶負(fù)電荷的陰離子者。這類染色劑一般用于染細(xì)胞漿,如伊紅Y,ku味酸,橘黃G等。堿性染色劑,能產(chǎn)生氫氧根離子(OH -)或其它負(fù)離子(如Cl-),而本身成為帶正電荷的陽離子者。這類染色劑常用于染細(xì)胞核,如堿性品紅等。
1.酸性染色劑:色原——助色團(tuán)——Na→[色原-助色團(tuán)]+Na+。常用的如伊紅,酸性品紅,ku味酸,橘黃G,剛果紅,水溶性苯胺藍(lán),淡綠等酸性染料常用以染細(xì)胞漿等堿性成份。
2.堿性染色劑:色原——助色團(tuán)——Cl→[色原-助色團(tuán)]++Cl。常用的如蘇木素,卡紅,次甲基藍(lán),甲苯胺藍(lán),硫堇,美藍(lán)等堿性染料常用以染細(xì)胞核等酸性成份。
嚴(yán)格地說,酸性染色劑的溶液并不一定呈酸性。同樣,堿性染色劑的溶液也未必呈堿性。所謂酸性和堿性染色劑僅指它們電離后其分子的主要染色部分是陽離子還是陰離子。因此稱為陽離子型染色劑或陰離子型染色劑更為適當(dāng)。
常規(guī)H.E染色中蘇木素染液的PH值約為7,此時(shí)胞核的化學(xué)成份電離產(chǎn)生H+,而其本身成為帶電荷的陰離子,所以被陽離子型的堿性染料劑所著色。伊紅染液為弱酸性。細(xì)胞的化學(xué)成份從溶液中獲取H+而成為帶正電荷的陽離子,因此與陰離子型的酸性染色劑(伊紅)相結(jié)合,染作紅色,這就是H.E染色分別顯示核和胞漿的機(jī)制。
3.中性染色劑:這是酸性染色劑和堿性染色劑的復(fù)合物,又可稱為復(fù)合染料。是由堿性染料(色堿的鹽)和酸性染料(色酸的鹽)配制而成。其中染色劑的分子很大,所以往往水中溶解度較低,需用酒精做溶劑。血液學(xué)中的血液涂片經(jīng)常使用的瑞氏染色劑及姬姆薩染色劑就是這種混合染色劑。其中的各種不同成分可分剔使核、胞漿和顆粒著色。