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ELISA檢測(cè)常見(jiàn)三種方法優(yōu)缺點(diǎn)

酶聯(lián)免yi 吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。ELISA檢測(cè)的三種方法雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法優(yōu)缺點(diǎn):


優(yōu)點(diǎn):



   雙抗夾心法:高靈敏、高專(zhuān)一性,抗原無(wú)須事先純化,孵育2次,操作簡(jiǎn)單,減少人為因素的影響,可靠的特異性。



   間接法:二抗可以加強(qiáng)信號(hào),而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析。不加酶標(biāo)記的1級(jí)抗體則能保留它多的免yi 反應(yīng)性。



   競(jìng)爭(zhēng)法:可適用比較不純的樣本,而且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。



缺點(diǎn):



    雙抗夾心法:缺少鏈霉親和素的抗體,起不到型號(hào)放大作用,而且抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。



    間接法:要經(jīng)過(guò)三次孵育,操作步驟繁瑣,稍微不注意會(huì)導(dǎo)致操作誤差,交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。



    競(jìng)爭(zhēng)法:競(jìng)爭(zhēng)法對(duì)于手法要求非常高,整體的敏感性和專(zhuān)一性都較差。