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ELISA實驗洗滌過程注意事項

   聚苯乙烯因其具有較強的吸附蛋白質的性能而被廣泛用于ELISA實驗的固相載體,聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,因此需要通過洗滌清chu在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。洗滌在 ELISA 過程中雖不是一個反應步驟,但卻決定著實驗的成敗。上述提到的血清中存在紅細胞或纖維蛋白原,可以在加樣前離心時得到控制,同樣也可以通過適當增加洗滌次數(shù)和浸泡時間減輕或避免對實驗結果的影響,同樣,對于血液存在的非特異性的IgG,實驗者很難在加樣時將其去除,那么解決的zui 佳時機就是洗滌過程。

ELISA實驗在洗滌過程中需注意以下幾點:

1、板要平整,尤其是在用洗板機洗板的過程中,往往是3排一起洗,如果板不平,就很可能造成洗液有殘留,從而導致非特異性結合不能清chu干凈,對實驗結果造成干擾。

2、洗液溫度,實驗表明,洗液溫度也會影響洗板的干凈程度,尤其是冬天溫度過低時容易出現(xiàn)“花板”問題。因此,zui 好保持室溫在20℃-30℃。

3、洗液要注滿孔,孔壁洗滌不干凈也易造成“花板”現(xiàn)象。

4、洗液要新鮮配置,洗液要臨用前新鮮配制,放置時間過長易產生絮狀物或混濁,造成賭孔或花板。

5、洗板次數(shù)不夠或洗滌間隔時間過短也會造成由于洗板不凈而造成“花板”。