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抗體的保存分析
抗體濃度過低(<1毫克/毫升)更容易發(fā)生抗體的失活以及增加物理吸附造成的損失。因此,我們都要盡量的保持抗體(例如,1-5毫克/毫升)在儲存期間的濃度。通常的做法是添加“載體”蛋白質(zhì),如純化牛血清白蛋白(BSA)以防止這種降解和損失。
1、多克隆抗體
多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而,一旦抗體被純化后,儲存在50%的甘油中于-20℃保存,即使沒有凍融,其活性的損失也可以觀察到,盡管其進程仍然非常緩慢。即使沒有甘油,只要你不反復(fù)凍融,抗體也可以存儲在-20℃幾年甚至幾十年。另一個重要的事情是,該抗體濃度應(yīng)高于1毫克/毫升,因為稀的抗體容易失去活性而且容易造成物理吸附導(dǎo)致的損失。
2、單克隆抗體
單克隆抗體可以保存在50%的甘油存放于-20℃。也可以將其保存在飽和硫酸銨于4℃或-20℃保存。多年未見有失活、xi 菌滋生以及氧化。而凍干法(冷凍干燥,干燥或從冰凍狀態(tài))為一些冰凍以后不穩(wěn)定抗體提供了一種替代的保存方法。在大多數(shù)情況下,凍干的抗體zui好是存放在-20℃。雖然冷凍干燥有許多優(yōu)點,它需要昂貴的設(shè)備和勞動力。
3、帶標記的抗體一般儲存在黑色容器中或者用錫箔紙蓋住。
4、酶標記抗體
堿性磷酸酶和其他酶結(jié)合物對于冷凍特別敏感,一般應(yīng)在4C短期存儲。
標記抗體長期保存zui好是在終濃度為50%的甘油或乙二醇中于-20C保存。雖然某些酶結(jié)合物可在無保護劑的情況下于-20C儲存,但必須分裝,以防止反復(fù)凍融。
5、熒光標記抗體
熒光遇光容易分解,熒光標記的試劑(不只是抗體)必須避光保存,其應(yīng)該存放在4C、避免讓其凝固。
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