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顆粒培養(yǎng)基使用方法及注意事項(xiàng)
使用方法:
1、取瓶?jī)?nèi)弧菌顯色培養(yǎng)基干粉71.3克，用1000ml蒸餾水或純水溶解，可按比例擴(kuò)增或縮小。攪拌加熱煮沸至*溶解，不需高壓滅jun，冷至約50℃，傾注滅jun平皿。
2、以無(wú)菌操作取檢樣25 g(mL)，加入3%氯化鈉堿性蛋白胨水225 mL，用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器以8 000 r/min均質(zhì)1 min，或拍擊式均質(zhì)器拍擊2 min，或用Pulsifier脈沖式樣品處理器均質(zhì)30秒，制備成1:10的均勻稀釋液。如無(wú)均質(zhì)器，則將樣品放入無(wú)菌乳缽中磨碎，然后放在500 mL的滅jun容器內(nèi)，加225 mL3%氯化鈉堿性蛋白胨水，并充分振蕩。
3、增菌：將上述1:10稀釋液于36 ±1 ℃培養(yǎng)8～18h。
4、分離：在增菌液中用接種環(huán)取一環(huán)，于弧菌顯色平板上劃線分離，于36 ±1 ℃培養(yǎng)18～24 h。5、通過(guò)驗(yàn)證試驗(yàn)進(jìn)一步確認(rèn)假定性副溶血性弧菌和其他弧菌，如氧化酶、革蘭氏染色、生化鑒定等。進(jìn)一步的試驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 稱量時(shí)注意粉塵，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。
2. 干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋，避免吸潮結(jié)塊。
3. 自制平板時(shí)需注意培養(yǎng)基的厚度，厚度過(guò)薄容易造成瓊脂水分保持性下降，開(kāi)裂;因此，一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養(yǎng)基，平板培養(yǎng)基厚度至少為2mm。
4. 即用型成品平板應(yīng)該盡量保持在2-8℃下保存且與存放容器冷凝管保持一定距離以避免凍損壞。產(chǎn)品多次在低溫與常溫之間變更會(huì)引起瓊脂的泌水，屬于正?，F(xiàn)象。使用前應(yīng)平衡至室溫且盡量在無(wú)菌干燥箱中預(yù)干燥。