ELISA試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)的必要性，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)可以熟悉整個(gè)實(shí)驗(yàn)的流程，發(fā)現(xiàn)可能忽略的問(wèn)題；可以測(cè)試樣本和試劑盒是否匹配，一旦出現(xiàn)不匹配的情況，不至于浪費(fèi)過(guò)多樣本；可以對(duì)樣品中目的分析物的濃度作一下大致參考，以確定合適稀釋度。ELISA試劑盒溫度把控：
1.試劑盒回溫：大多數(shù)ELISA檢測(cè)試劑盒為冷藏保存。從冰箱拿出來(lái)后，先不要急于打開試劑盒，要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無(wú)冷凝水。檢測(cè)所用的試劑需充分混勻且徹底溶解后再用。
2.環(huán)境溫度的控制：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備溫濕度表，且確保定期計(jì)量。根據(jù)天氣情況設(shè)定實(shí)驗(yàn)室空調(diào)制冷或加溫功能，待室溫穩(wěn)定且無(wú)干擾的條件下再開始檢測(cè)流程。選用帶溫控裝置的孵育儀器，如恒溫孵育器、恒溫培養(yǎng)箱、多功能酶標(biāo)儀等。注意要提前開啟預(yù)熱。
大多數(shù)試劑盒加樣后反應(yīng)時(shí)間較短，環(huán)境溫度對(duì)檢測(cè)結(jié)果會(huì)有很大影響，所以控制好環(huán)境溫度是保證試劑盒檢測(cè)結(jié)果有效的重要因素。
3.孵育：孵育時(shí)要保證溫度均勻，防止揮發(fā)變干。孵育時(shí)使用封板膜，并置于暗處孵育。多塊板一起實(shí)驗(yàn)時(shí)，要平放各板，不要疊放，避免溫度擴(kuò)散的不均勻性或邊緣效應(yīng)。