ELISA復(fù)孔做的不好,CV值差異大可能原因分析:
1、復(fù)孔OD450數(shù)值在0.5-2.5之間計算的偏差相對較小,小于0.5會由于操作誤差導(dǎo)致計算的CV值偏高,復(fù)孔樣品數(shù)量在5-10個合適。
2、操作時按照標準動作進行加樣,比如要求槍頭不能碰觸到孔壁內(nèi)側(cè)和底面,槍頭尖部的殘留液體可以觸碰到液面,使之流入樣品孔。
3、加樣盡量快速準確,不要產(chǎn)生氣泡。
4、樣品需要做預(yù)實驗,使用不同濃度進行測試,找到佳的稀釋比。錯誤的稀釋比會導(dǎo)致復(fù)孔誤差大