公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
產(chǎn)品名稱
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CathAb人組織蛋白酶抗體ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human Cathepsin Antibodies,Cath Ab ELISA Kit
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貨號
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PH096328
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L
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5 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
人卵泡抑素(FST)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 茶樹菇Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
人鐵調(diào)素(Hepc)酶聯(lián)吸附測定試劑盒圍小叢殼菌Phospho-Akt (Ser473) Blocking Peptide
人生長停滯特異性蛋白6(Gas6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒乳桿菌屬Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) Blocking Peptide
人粒集落激因子(G-CSF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒假單胞菌屬S6 Ribosomal Protein Blocking Peptide
人生長分化因子15(GDF15)酶聯(lián)吸附測定試劑盒栗疫菌Zap-70 Blocking Peptide
人粒巨噬集落激因子(GM-CSF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) Blocking Peptide
人可溶性糖蛋白130(sgp130)酶聯(lián)吸附測定試劑盒東方伊薩酵母Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) Blocking Peptide
人肝生長因子(HGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 海蘇特氏菌Phospho-HER3/ErbB3 (Tyr1289) Blocking Peptide
人β干擾素(IFN-β)酶聯(lián)吸附測定試劑盒節(jié)桿菌屬ATF-4 (D4B8) Rabbit mAb
人胰島素樣生長因子1(IGF-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 葡萄座腔菌DEPTOR/DEPDC6 (D9F5) Rabbit mAb
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿菌Phospho-GRB10 (Ser476) (D4E6) Rabbit mAb
人白介素1α(IL-1α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒鰻利斯頓氏菌Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb
人白介素1受體拮抗劑(IL-1ra)酶聯(lián)吸附測定試劑盒尖鐮孢(尖孢鐮刀菌 )(可定)Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb
人白介素1受體II(IL-1R2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒粒狀青霉TCF12/HEB (D2C10) Rabbit mAb
人前列腺特異性抗原(PSA/KLK3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒三孢布拉霉FKBP4 Antibody
CathAb人組織蛋白酶抗體ELISA檢測試劑盒氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human anti-2019-nCoV(N) IgM ELISA Kit內(nèi)肽-2(EM-2)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
唾液酸糖蛋白受體1抗體Human FOLR3(Folate receptor gamma) ELISA Kit卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
芳香基硫酸酯酶F抗體Human CTHRC1(Collagen triple helix repeat-containing protein 1) ELISA Kit卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
A激酶錨定蛋白5抗體Human CAMK2B(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type II subunit beta) ELISA Kit氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體Human CDCA8(Cell division cycle-associated protein 8) ELISA Kit神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
ASTE1蛋白抗體Human CH25H(Cholesterol 25-hydroxylase) ELISA Kit前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4B抗體Human MAP4K4 ELISA Kit小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒,
微絲相關(guān)蛋白1抗體Human Matrilin 2 ELISA Kit小鼠葉酸(FA)ELISA試劑盒,
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
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