樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
產(chǎn)品名稱
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Pim1人前病毒整合位點1ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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human proviral integration site 1,Pim1 ELISA Kit
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貨號
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PH097218
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
2400 ng/L
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5 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
雞葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 根瘤Human GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit
雞載脂蛋白C2(ApoC2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 卵形巴貝斯蟲(張家川株)Human CL (Cardiolipin) ELISA Kit
雞γ干擾素誘導(dǎo)單核因子(MIγ/CXCL9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒尖孢鐮刀Human HK1 (Hexokinase 1) ELISA Kit
雞膠原酶II(Collagenase II)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 噬肌畢赤酵母Human NF (Neurofilament) ELISA Kit
雞封閉蛋白9(CLDN9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 棒曲霉Human P2 (Myelin Protein 2) ELISA Kit
雞血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒卷枝毛霉Human NPY (Neuropeptide Y) ELISA Kit
雞SPARC樣蛋白1(SPARCL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒解脂復(fù)膜孢酵母Human NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit
雞紐蛋白(VCL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒運動節(jié)桿Human L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit
雞基質(zhì)衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒赤水太白山Human NT-3 (Neurotrophin-3) ELISA Kit
雞基質(zhì)衍生因子4(SDF-4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Ramlibacter sp.Human NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit
雞甲狀腺原氨酸(Thyronine)酶聯(lián)吸附測定試劑盒香菇Human NTRK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2 ) ELISA Kit
雞神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 馬紅球Human NTRK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3 ) ELISA Kit
雞尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(PLAUR/uPAR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒韓國溶桿Human NAIP (Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein) ELISA Kit
雞蛋白酪氨酸磷酸酶受體J(PTPRJ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蘇云金芽孢桿Human NPHN (Nephrin) ELISA Kit
雞血紅素氧化酶2(HO2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Hymenobacter perfususHuman GTEAGE (Glomerular Tissue Extract Advanced Glycosylation End Products) ELISA Kit
Pim1人前病毒整合位點1ELISA檢測試劑盒干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)因子2抗體Human PTPN2(Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 2) ELISA KitN-乙酰-L-賴氨酸
白介素-1受體相關(guān)激酶2抗體Human PTPN5 ELISA Kit胰蛋白酶(豬胰)
磷酸化胰島素受體β抗體Human PTPN4 ELISA Kit纖維素酶R-10
磷酸化胰島素受體β抗體Human PTPN9 ELISA Kit鏈霉素硫酸鹽
整合素alpha E2 抗體Human PTPN7 ELISA Kit木聚糖
整合素αV抗體Human PTMS ELISA Kit3-硝基
球蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human PTPRE ELISA Kit四正丁基氯化銨
胰島素樣生長因子1受體抗體Human PTAFR ELISA Kit小茴香油