EGLN1小鼠Egl小鼠Nine同源物1ELISA方法

樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

包裝規(guī)格：液體盒裝 96T/48T
保存條件：2-8℃（長(zhǎng)期不使用時(shí)，部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下）。
有效期：6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸：低溫避光，請(qǐng)勿重壓，輕拿輕放（現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。）
Elisa試劑盒可測(cè)種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床。

組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板：一塊(96孔) 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔)，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管，在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本：
室溫血液自然凝固 20 min 后，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），保存過程中如有沉淀，請(qǐng)?jiān)俅坞x心，避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本：
將全血收集到含抗血凝劑的管中，根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA，檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合 20 min，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。
操作步驟：
實(shí)驗(yàn)開始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1.         加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl（取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物素標(biāo)記抗體工作液）100μl，37℃，60分鐘。
5.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.         依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
ADAMTS10  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶10型抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

BCAT2/BCAM  支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

Bcl2A1  BCL2相關(guān)蛋白A1抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

Bcl3  B細(xì)胞**瘤蛋白3抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

HSD17B6  17-β-羥脫氫酶6抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

TFF1/BCEI  癌雌**誘導(dǎo)蛋白抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

Galectin 1  半乳糖凝集素1抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

CENPB  著絲粒蛋白B抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

STMN3  原癌基因18家族STMN3蛋白抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

NPHS2/Podocin  腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

Cofilin  肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

EphA5/Eph receptor A5  酪氨酸蛋白激酶A5受體抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

HHEX/HMPH  同源盒蛋白PRH抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

ETS1 associated protein II/EAPII  ETS1相關(guān)蛋白2抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

TLR7  Toll樣受體7抗體    特價(jià)促銷 0.1ml
EGLN1小鼠Egl小鼠Nine同源物1ELISA方法熒光素標(biāo)記狗IgMAnti-HIST1H2BH Antibody小鼠脂肪酸結(jié)合蛋白3（FABP3）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素FITC標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HIST1H2BB Antibody小鼠β2微球蛋白（BMG/β2-MG）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素標(biāo)記羊IgMAnti-HIST1H2BH Antibody大鼠胰島素原（PI）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素標(biāo)記豚鼠IgGAnti-HIRA Antibody大鼠高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素標(biāo)記豚鼠IgMAnti-Histone H3 Antibody大鼠硒蛋白P（SEPP1）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素標(biāo)記馬IgGAnti-HLA-DOA Antibody大鼠膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（ChAT）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素標(biāo)記馬IgMAnti-HK3 Antibody小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶11（MMP-11）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素標(biāo)記人IgGAnti-HLA-DOA Antibody小鼠硬骨素（SOST）elisa定量檢測(cè)試劑盒