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PCR反應(yīng)產(chǎn)物量過少分析：
（1）退火溫度不合適。以2度為梯度設(shè)計梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。
（2）DNA模板量太少。增加DNA模板量。
（3）PCR循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。
（4）引物量不足。增加體系中引物含量。
（5）延伸時間太短。以1kb/分鐘的原則設(shè)置延伸時間。
（6）變性時間過長。變性時間過長會導(dǎo)致DNA聚合酶失活。
（7）DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈