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產(chǎn)品資料

兔肝竇內(nèi)皮細胞

兔肝竇內(nèi)皮細胞
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:兔肝竇內(nèi)皮細胞
  • 產(chǎn)品型號:FS-016471
  • 產(chǎn)品展商:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
兔肝竇內(nèi)皮細胞采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
產(chǎn)品描述

公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。

產(chǎn)品名稱 兔肝竇內(nèi)皮細胞
規(guī)格 詳見說明書
貨號

FS-016471

培養(yǎng)操作步驟 :

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 

2.所使用的蓋玻片應該為玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)方法:

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

細胞處理方法:

產(chǎn)品名稱以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。

一.貼壁細胞

客戶接收到細胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養(yǎng)瓶外部。

肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。

顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

二.懸浮細胞

1. 接收到細胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。

3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒)。

5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。


芐瞇鹽酸鹽 pMCSG39

COX IV小鼠單抗(100 μLPIPES-NaOH BufferPIPES-NaOH 緩沖液),0.3MpH5.5-6.0任選

pUXV3 炭疽桿PCR檢測試劑盒

Stripping Buffer,4X CMC medium (n2/co2)

人膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA Kit pAL4

Medium with polyhydroxybutyric acid as carbon source 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA Kit

pFPV25.1 SMC細胞株

魚促黃體ELISA Kit pKLAC160908-4460

酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒 Alizarin red S(茜素紅-S

pSM147 沙門氏PCR檢測試劑盒

HEPPS Buffer,0.2M,pH8.0 200uL RNAase-free黃吸頭(袋裝帶芯)

β2糖蛋白(β2-GP)ELISA Kit L3799

Spirochaeta caldaria medium 人抗浦肯野細胞抗體/Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA Kit

林旦 英文名稱:Lin Dan 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

兔肝竇內(nèi)皮細胞氯氮平 英文名稱:Clozapine 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

卡鉑 英文名稱:Carboplatin 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

卡前列甲酯 英文名稱:Carboprost methylate 規(guī)格::30mg 保存::-20℃,避光

卡托普利二硫化物 英文名稱:Kato Pury two sulfide 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

卡托普利 英文名稱:Kato Pury 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

倍他環(huán)糊精 英文名稱:Beta cyclodextrin 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

枸櫞酸他莫昔芬E-異構(gòu)體 英文名稱:Tamoxifen citrate E isomers 規(guī)格::30mg 保存::-20℃,避光

氟胞嘧啶 英文名稱:Flucytosine 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

氟康唑 英文名稱:Fluconazole 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

英文名稱:Haloperidol 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

 


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