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產(chǎn)品資料

兔甲狀腺成纖維細(xì)胞

兔甲狀腺成纖維細(xì)胞
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:兔甲狀腺成纖維細(xì)胞
  • 產(chǎn)品型號:FS-016487
  • 產(chǎn)品展商:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
兔甲狀腺成纖維細(xì)胞采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
產(chǎn)品描述

細(xì)胞處理方法:

產(chǎn)品名稱以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。

一.貼壁細(xì)胞

客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養(yǎng)瓶外部。

肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。

顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。

1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

二.懸浮細(xì)胞

1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。

3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。

5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。

產(chǎn)品名稱 兔甲狀腺成纖維細(xì)胞
規(guī)格 詳見說明書
貨號


FS-016487


培養(yǎng)操作步驟 :

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。


10uL RNAase-free白吸頭(盒裝已滅) 大鼠乙酰膽堿酯酶(ACHE)ELISA Kit

L3617 Medium 514 plus additional salt

人抗流行熱病毒抗體IgG (EHF)ELISA Kit pcDNA4/V5-His C(pcDNA4V5HisC)

NCI-H295R [NCIH295R]細(xì)胞株 人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA Kit

pIS2 大提柱式真DNAout

二蘇糖醇 pOSIP-TO

山羊抗人IgG(H+L),堿磷酸酶標(biāo)記 Spoerrl染色法神經(jīng)組織染色試劑盒

pWE15 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA Kit

TEA Buffer,0.2M,pH8.5 Desulfitobacterium (pce) medium

人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA Kit pASZ11

293T細(xì)胞株 人可溶肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)Elisa Kit

pGCAT-A 非酶RNA1.0

豬白介素10(IL-10)ELISA Kit pMCSG11

酚磺乙胺 英文名稱:Etamsylate 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

奮乃靜 英文名稱:Fen Naijing 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

兔甲狀腺成纖維細(xì)胞對羥基苯乙酰胺 英文名稱:P-hydroxy phenyl acetamide 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

對甲苯磺酰胺 英文名稱:Para toluene sulfonate 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

丁溴東莨菪堿 英文名稱:Scopolamine Butylbromide 規(guī)格:??100mg 保存::-20℃,避光

地塞米松 英文名稱:Dexamethasone 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

地蒽酚 英文名稱:Dithranol 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

膽石酸 英文名稱:Gallstone acid 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

達(dá)那唑 英文名稱:Danazol 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

醋酸曲安奈德 英文名稱:Triamcinolone acetonide acetate 規(guī)格::100mg 保存::-20℃,避光

醋酸潑尼松龍 英文名稱:Prednisolone acetate 規(guī)格::50mg 保存::-20℃,避光

 



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