分光光度法基本簡介
選擇吸收
分光光度法物質(zhì)與光作用，具有選擇吸收的特性。有色物質(zhì)的顏色是該物質(zhì)與光作用產(chǎn)生的。即有色溶液所呈現(xiàn)的顏色是由于溶液中的物質(zhì)對光的選擇性吸收所致。由于不同的物質(zhì)其分子結(jié)構(gòu)不同，分光光度法對不同波長光的吸收能力也不同，因此具有特征結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)集團，存在選擇吸收特性的*大實收波長，形成*大吸收峰，而產(chǎn)生特有的吸收光譜。即使是相同的物質(zhì)由于其含量不同，對光的吸收程度也不同。利用物質(zhì)所特有的吸收光譜來鑒別物質(zhì)的存在（定性分析），或利用物質(zhì)對一定波長光的吸收程度來測定物質(zhì)含量（定量分析）的方法，稱為分光光度法。
定量依據(jù)
朗伯一比爾（Lambert - Beer）定律是分光光度法定量分析依據(jù)的基本原理。當(dāng)一束單色光（指路由一種顏色的光）通過一均勻的溶液時，一部分被吸收，一部分透過。設(shè)入射光的強度為I0，透射光強度為I，則I/I0為透光度，用T表示。百分透過率為 T% = （I/I0）x100%
研究表明：溶液對光的吸收程度即吸光度（A）（又稱消光度E、或光密度D）與透光度（T）呈負對數(shù)關(guān)系，即：A = - lgT
朗伯定律：有色溶液的吸光程度（A）與其液層厚度（光程）b成正比。當(dāng)溶液濃度不變時，溶液的液層厚度越大，對光的吸收程度A值越大，則透光度越小。