腎衰竭大鼠模型制備:
1. 肌肉注射麻醉,選取背部左側(cè)切口,暴露左腎,剝離腎包膜,將腎的上下級各1/3切除,明膠海綿壓迫止血。一期手術(shù)后7天,開始進(jìn)行二期手術(shù)。同樣方法麻醉,背部右側(cè)切開暴露右腎,結(jié)扎腎蒂,摘除右腎。假手術(shù)組與5/6NT動物同時進(jìn)行二次手術(shù),但僅剝離腎包膜暴露腎臟后關(guān)腹。5/6NT組于二期手術(shù)后30、60、90天時,每組隨機(jī)選取15、15、18只大鼠處死,進(jìn)行分析。
2. 樣本采集和指標(biāo)測定:麻醉下心臟采血,收集后經(jīng)離心分離出血清,尿液和血清均保存于-20°冰箱。取左腎組織稱重,用4%多聚甲醛固定,石蠟包埋。檢測24小時尿蛋白、血清CR及BUN,腎組織做病理分析。
腎衰竭大鼠模型特點:5/6腎切除后,系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)增生,腎小球硬化,腎小管灶狀萎縮,間質(zhì)纖維化,表現(xiàn)出于人類腎臟纖維化相一致的病理過程。5/6腎切除組24小時尿蛋白量、血BUN、血cr水平明顯升高。殘腎的腎重/體重逐漸增加,到術(shù)后90天幾乎接近假手術(shù)組大鼠 左腎腎重,體重。
腎衰竭大鼠模型模型評估和應(yīng)用:5/6腎切除CRF模型符合腎小球高度濾過致腎衰竭學(xué)說,其優(yōu)點是在保護(hù)殘存腎組織相對正常的情況下造成殘存腎組織超負(fù)荷工作模型,排除了各種原發(fā)性腎臟病的致病因素對殘存腎單位的影響,使影響因素簡單化。該模型的缺點是需要有相應(yīng)的手術(shù)場地,對操作技能要求高,且要防止出血和術(shù)后感染,模型制備周期較長。