首頁 >>> 產(chǎn)品目錄 >>> A類
儀表展覽網(wǎng) >>> 展館展區(qū) >>> PCR定量試劑盒
> PCR定量試劑盒

產(chǎn)品資料

PCR定量試劑盒

PCR定量試劑盒
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:PCR定量試劑盒
  • 產(chǎn)品型號:XG-R64266
  • 產(chǎn)品展商:西格
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
PCR定量試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品描述

產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷
靈敏度高:可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高:有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高:復(fù)孔間差異小,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu):擴(kuò)增效率高,熒光信號強(qiáng)

產(chǎn)品名稱

PCR定量試劑盒

規(guī)格

50T

貨號

XG-R64266

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)**的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾高壓。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
86632-03-33,4,5-三咖啡??鼘幩釓S家  3,4,5-Tricaffeoylquinic acid   組織PAK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

865-21-4長春堿規(guī)格  vinblastine   組織P38β2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

865-21-4長春花堿說明書   Vinblastine   組織NEK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

861691-37-4葒草素-2"-0-B-L半乳糖苷說明書  2"-O-beta-L-galactopyranosylorientin   組織NADP依賴性甘油-3-1酸脫氫酶(NADP-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NADP-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒20

860-79-7黃楊堿廠家  Cyclovirobuxin D   組織NADPH氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒20/50(10樣本)
小鼠組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC1 ELISA Kit  1258-84-0扁塑藤素說明書  Pristimerin

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T  572-30-5扁蓄苷品牌  Avicularin

人抗氨酰NA合成酶,細(xì)胞質(zhì)(AARS)抗體試劑盒 Human ai alanyl-NA syhetase,cytoplasmic(AARS)aibody ELISA kit  表大戟二烯醇規(guī)格  Tirucallol

rabbitTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  1072-93-1表告依春廠家  epigoitrin

載玻片細(xì)胞CYTOCHROMEC蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  490-46-0表兒茶素說明書  Epicatechin
Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISA
試劑盒大鼠成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  64439-81-210-羥基喜樹堿品牌  10-Hydroxycamptothecin

小鼠組織蛋白酶S(CTSS)ELISA試劑盒 ,英文名: CTSS ELISA Kit  13-去羥基印烏堿規(guī)格  13-Dehydroxyindaconintine

綿羊白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T 473-08-5a-香附酮廠家  α-Cyperone

犬胰島素樣因子3(INSL3)試劑盒 Dog insulin-like 3,INSL3 ELISA Kit  50-99-7D-無水葡萄糖說明書  D(+)-Glucose

英文名稱MouseApelin-12ELISAKIT小鼠Apelin-12規(guī)格:96T/48T  10284-63-6D-松醇品牌  D-Pinitol
豬生長抑素受體5   英文名稱:   Porcine Somatostatin Receptor 5 Elisa Kit   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   SS5  Temozolomide  85622-93-1  中文名:替莫唑胺  分子式:C6H6N6O2 

豬生長抑素elisa試劑盒   豬生長抑素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豬生長抑素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬生長抑素試劑盒、豬生長抑素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。     Sitosteryl palmitate  2308-85-2  中文名:β-谷甾醇棕櫚酸酯  分子式:C45H80O2 

豬生長抑素(SS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Senkyunolide G  94530-85-5  中文名:洋川芎內(nèi)酯分子式:C12H16O3 

豬生長**釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝   cholate  中文名:膽酸鈉  分子式:C24H39NaO5  度:98.5%

豬生長**釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T   prasterone sulfate  中文名:去氫表雄酮硫酸鈉鹽  分子式:C19H27NaO5S  度:98.0%
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
PCR定量試劑盒在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。


產(chǎn)品留言
標(biāo)題
聯(lián)系人
聯(lián)系電話
內(nèi)容
驗(yàn)證碼
點(diǎn)擊換一張
注:1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發(fā)送信息!
2.如有必要,請您留下您的詳細(xì)聯(lián)系方式!
  • 溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
  • 免責(zé)申明:以上內(nèi)容為注冊會員自行發(fā)布,若信息的真實(shí)性、合法性存在爭議,平臺將會監(jiān)督協(xié)助處理,歡迎舉報
產(chǎn)品留言
標(biāo)題
內(nèi)容
聯(lián)系人
聯(lián)系電話
電子郵件
公司名稱
聯(lián)系地址
驗(yàn)證碼
點(diǎn)擊換一張
注:1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發(fā)送信息!
2.如有必要,請您留下您的詳細(xì)聯(lián)系方式!