小鼠白介素10(IL-10) ELISA試劑盒操作方法

產(chǎn)品名稱(chēng)： 小鼠白介素10(IL-10) ELISA試劑盒操作方法
英文名稱(chēng)：Mouse interleukin 10, IL-10 Elisa Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：XG-M64019
規(guī)格 ：48T/96T
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

小鼠白介素10(IL-10) ELISA試劑盒操作方法 英文名稱(chēng)：Mouse interleukin 10, IL-10 Elisa Kit  靈敏性高，高效性，原裝進(jìn)口抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無(wú)效包退包換，公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。 48T/96T。

流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100μL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

備試劑與收集血樣：
1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

操作步驟：
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
2、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品*終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4、配液：將30倍（48T 的20 倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 
7、溫育：操作同3。
8、洗滌：操作同5。
9.在確保酶標(biāo)板底無(wú)水滴及孔內(nèi)無(wú)氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度 （O.D. 值）。
10、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
11、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
12、測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J野馬追內(nèi)酯B（標(biāo)準(zhǔn)品）Eupalinolide B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

IL12B Others Human 人 IL12B / P40 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 長(zhǎng)春瑞濱（標(biāo)準(zhǔn)品）Vinorelbine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品，長(zhǎng)期不穩(wěn)定

成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1酸長(zhǎng)春瑞濱（標(biāo)準(zhǔn)品）Vinorelbine tartrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

ERBB2 Others Cynomolgus 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硝呋太爾Nifuratel質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1硝呋太爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Nifuratel質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
斑馬魚(yú)尾鰭細(xì)胞;AB.9 人肝癌細(xì)胞，SNU-182細(xì)胞 HEp-2(喉表皮樣癌細(xì)胞)硫酸鈰四水(>99%，BR)Cerium(IV) sulfate tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

人腦瘤細(xì)胞;SF126碳酸銫(>99%，BR)Cesium carbonate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,1-環(huán)丙基乙二羧酸1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%

非洲綠猴腎細(xì)胞;VEROTAPS；N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸TAPS質(zhì)量規(guī)格：>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

ACVR1B Others Rat 大鼠 ACVR1B / ALK-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) PI3K 抑制劑LY294002質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,進(jìn)分
DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) BariumChorideDihydrate錄化鋇二水ACS級(jí)白色晶體粉末RT不sigma

貓腎細(xì)胞;F813-基-2-肖基本加醋 3-Mqthyl-2-nitnobqnzoic ccid

LTPEP-a-2細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞,VERO C1008 (E6)細(xì)胞 CM-M042小鼠直腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLGUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍技術(shù)級(jí)白色至微黃色顆
IL2RA Others Human 人 IL2Ra / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羧甲司坦（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定S-Carboxymethyl-L-cysteine

脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基AdM硝酸異山梨酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Isosorbide dinitrate

CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 月桂氮卓酮;氮酮質(zhì)量規(guī)格：>97%Laurocapram

大鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Oxymetazoline

MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS雙壁碳納米管(>50%) 小于5nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格：Carbon Nanotube Double-walled (>50%) below 5nm(diam.), 5-15μm(length)
小鼠白介素10(IL-10) ELISA試劑盒操作方法檢測(cè)程序：公司產(chǎn)品僅用于科研，
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

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