抗體的鑒定:產(chǎn)品僅用于科研
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
人腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:TNFSF15,TL1,VEGI, VEGI192A,TNF ligand-related molecule 1,TNF superfamily ligand TL1A,vascular endothelial cell growth inhibitor,vascular endothelial growth inhibitor-192A Human TL1A(Tumor Necrosis Factor Related Ligand 1A) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組TL1A濃度
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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Anti-ZNRF2西格抗體
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0.2ml/200μg
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XG-01K88336
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英文名稱 Anti-ZNRF2
中文名稱 鋅指/環(huán)指蛋白2抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 24kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNRF2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
別 名 E3 ubiquitin-protein ligase ZNRF2; Protein Ells2; RING finger protein 202; Zinc/RING finger protein 2; Znrf2; ZNRF2_HUMAN.
稀釋方法:
方法1. 實(shí)驗(yàn)前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復(fù)凍溶。
方法2. 實(shí)驗(yàn)前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預(yù)試驗(yàn)可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結(jié)論。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時(shí),目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石??切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):
1.產(chǎn)品名稱如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合;
7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用;
8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。
Endothelin (16-21) RES-701-1 β -Endorphin (28-31)(human) β -Endorphin (equine) Dynorphin A (1-13)
Endothelin-3 (human, mouse, rabbit, rat) BE-18257B δ -Endorphin (human) β -Endorphin (bovine,camel, mouse) (Pro3)-Dynorphin A (1-11) amide
Endothelin-2 (human, canine) JKC-301 δ -Endorphin (bovine,camel, mouse, ovine) β -Endorphin (1-16) (D-Ala3)-Dynorphin A (1-11) amide
Succinyl- (Glu9,Ala11?15)- Endothelin-1 (8-21), IRL-1620 Tyr-Big Endothelin-1fragment (22-38) (human) β -Endorphin (1-17) Endomorphin-2 Dynorphin A (1-11) amide
Acetyl-(Ala11?15)-Endothelin-1 (6-21), BQ-3020 Big Endothelin-1fragment (22-38) (human) β -Endorphin (30-31)(human) Endomorphin-1 Dynorphin A (1-10) amide
2,3,4,5,6-五氯甲苯 標(biāo)準(zhǔn)品 2,3,4,5,6-Pentachlorotoluene 10ng/ul于環(huán)己烷,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
五氯代苯,10ng/ul于環(huán)己烷 標(biāo)準(zhǔn)品 Tetradifon 10ng/ul于環(huán)己烷,10ml 特征形態(tài) 液態(tài)
Pentachlorobenzene,10ng/ul 標(biāo)準(zhǔn)品 Tetradifon 10ng/ul于乙腈,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
Anti-ZNRF2西格抗體Tenuifoliside A 中文名:遠(yuǎn)志蔗糖酯A 分子式:C31H38O17 度:95.0% 兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit
3,3-Dimethylacrylic acid 中文名:千里光酸 分子式:C5H8O2 度:98.0% 兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISAKit
Campsiketalin 中文名: 分子式:C10H20O4 度:95.0% 兔子內(nèi)皮抑素elisa試劑盒 兔子內(nèi)皮抑素試劑盒 規(guī)格型
應(yīng)用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗(yàn),質(zhì)量保證,無效免費(fèi)退換,另外本公司長期供應(yīng)化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體。
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