培養(yǎng)及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
基本信息:
產(chǎn)品名稱:DH5α 含pACYC177質(zhì)粒 大腸桿菌保存
拉丁文:
Escherichia coli DH5α( pACYC177)
提供形式: 西林瓶,菌片
**等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: pACYC177質(zhì)粒提取。
培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基,含50μg/mL氨芐青霉素鈉。
酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min**。 **結(jié)束,冷卻降溫后加入氨芐青霉素鈉,使培養(yǎng)基中氨芐青霉素鈉*終含量為50μg/mL。
生長條件: 37℃ 好氧
存儲條件: -
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 0012
生長條件 28℃
存儲條件 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細(xì)胞的損害。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
血管緊張素原(抗原) AT (Angiotenogen) 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 0.5mg
Muellerian抑制因子抗原 AMH/MIS 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 1mg
基質(zhì)金屬蛋白酶-3(抗原) MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 0.5mg
腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原) PACAP-38 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 0.5mg
丙酮酸激酶-M2(抗原) M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 0.5mg
重組人腫瘤壞死因子 rh-TNF-Alpha(rh-Tumor Necrosis Factor alpha) 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 100ug
CD24抗原 CD24 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 0.5mg
AU5 tag標(biāo)簽抗原 AU5 tag 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 0.5mg
發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白多肽抗原 Nadrin peptide 現(xiàn)貨供應(yīng) 規(guī)格: 0.5mg
DH5α 含pACYC177質(zhì)粒 大腸桿菌保存CSFV/Classical swine fever virus 豬瘟抗體 0.2ml
NLG1/KIRREL2 腎病樣蛋白1抗體 0.1ml
SKA3 紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白3抗體 0.2ml
KCTD12 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 0.1ml
FGF12 成纖維細(xì)胞生長因子12抗體 0.2ml
phospho-RPH3AL(Ser234) 磷酸化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
phospho-SYN1(Ser603) 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
PPT1 棕櫚酰蛋白硫酯酶1抗體 0.2ml
CXCR1/IL-8RA 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 0.1ml
MKKS/BBS6 巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS6抗體 0.2ml
KCNAB1/Kv beta 1 電壓門控鉀通道蛋白1抗體 0.2ml
C10orf47 10號染色體開放閱讀框47抗體 0.2ml
phospho-B-Raf (Ser365) 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
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