凍存原代細胞培養(yǎng)步驟：
1.將一管細胞從液氮罐中取出，注意保護手和眼睛。
2.將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉，直到管內物體完全融化。
3.將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉入無菌環(huán)境。
4.用70%的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。
5.打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋(注意，由于凍存管有負壓，開蓋時可能會有少量溢出，這是正常現(xiàn)象)。
6.用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細胞。
7.蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
8.將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中。
9.放入培養(yǎng)箱后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。