原理:利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體。間接法常用于檢測抗體,ELISA間接法通用操作過程為:
1. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
2. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)。
3. 洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結(jié)。
4. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量。