技術(shù)特點(diǎn):
1、靈敏度高
PCR 產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg = 10-12)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(μg=-6)水平。能從 100 萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR 的靈敏度可達(dá) 3 個(gè) RFU(空斑形成單位);在細(xì) 菌學(xué)中小檢出率為 3 個(gè)細(xì) 菌。
2、特異性強(qiáng)
PCR 反應(yīng)的特異性決定因素:
引物與模板 DNA 特異正確的結(jié)合;
堿基配對原則;
Taq 聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
靶基因的特異性與保守性。
3、簡便、快速
只需要一次性將反應(yīng)液加好后,就可以進(jìn)行擴(kuò)增。一般 2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
4、純度要求低
不需要分離病毒或細(xì) 菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及 RNA 均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗漱液、毛發(fā)、細(xì)胞、活組織等 DNA 擴(kuò)增檢測。