逆轉(zhuǎn)錄（reverse transcription）是以 RNA 為模板合成 DNA 的過程，即 RNA 指導下的 DNA 合成。優(yōu)化及注意事項：
1、逆轉(zhuǎn)錄 PCR 時，提取 RNA 是關(guān)鍵，需分離高質(zhì)量 RNA（純度和完整性）。
2、整個操作過程需使用去 RNA 酶的槍頭、EP 管等耗材。
3、 逆轉(zhuǎn)錄過程中要謹防 RNA 酶的污染，加入 RNA 酶抑制劑。
4、 為了防止非特異性擴增，必須設(shè)陰性對照。
5、逆轉(zhuǎn)錄實驗應(yīng)全程在冰上操作完成，操作過程應(yīng)避免 RNase 污染。
6、 提高逆轉(zhuǎn)錄預熱溫度（也可根據(jù)相應(yīng)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進行調(diào)整）。
7、 減少基因組 DNA 污染，可使用去基因組的逆轉(zhuǎn)錄試劑盒。