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產(chǎn)品資料

人皰疹病毒(HHV)PCR檢測試劑盒

人皰疹病毒(HHV)PCR檢測試劑盒
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:人皰疹病毒(HHV)PCR檢測試劑盒
  • 產(chǎn)品型號:FS-P64050
  • 產(chǎn)品展商:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
人皰疹病毒(HHV)PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品描述

產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人皰疹病毒(HHV)PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P64050
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。

實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

組織肝脂酶活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

1-甲基海因(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-METHYLHYDANTOIN 616-04-6 質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用

植物β-淀粉酶(β-AMYLASE)活性PNPG5酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

3-羧氨基利巴韋林鹽酸鹽 Viramidine Hydrochloride 40372-00-7 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

天青石藍(lán) Celestine blue 1562-90-9 質(zhì)量規(guī)格:BS

/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxypaeoniflorin 39011-91-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

乙基曙紅(>95%,BS) Ethyl eosin 1628740 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS

細(xì)胞游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次

5'-胞苷酸(CMP) Cytidine 5'-monophosphate  63-37-6 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

 COLLAGEN II蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次

硫酸西梭米星/硫酸西索霉素 Sisomicin Sulfate 53179-09-2 質(zhì)量規(guī)格:≥580IU/ mg,BR

碳酸鋰(SP) Lithium carbonate 554-13-2 質(zhì)量規(guī)格:SP

載玻片細(xì)胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

藍(lán)藻甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次

牛奶維生素A含量比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

人皰疹病毒(HHV)PCR檢測試劑盒phospho-PKC delta (Tyr311)  磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 規(guī)格: 0.1ml

HBeAg(2E9)  人乙型肝炎e抗原單克隆抗體(1) 規(guī)格: 0.1ml

RAB9  ras基因家族Rab9蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Ube1L/UBE2  泛素激活酶2(泛素激活酶E1相關(guān)蛋白抗體) 規(guī)格: 0.2ml

RNF213  環(huán)指蛋白213 規(guī)格: 0.2ml

phospho-PAK1(Thr212)  磷酸化p21激活激酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-SYN1(Ser603)   磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml

CD147/TCSF/Emmprin  細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-human IgG/FITC  FITC標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.3ml

Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

TNFSF14  瘤壞死因子配體超家族成員14抗體 規(guī)格: 0.1ml

BIN2/BRAP1  相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

PTPRA  酪氨酸磷酸酶α抗體 規(guī)格: 0.2ml

GPNMB/Osteoactivin  GPNMB抗體 規(guī)格: 0.2ml

CTBP1  C端結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

ADCY3  苷酸環(huán)化酶3抗體 0.2ml

 



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