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ELISA試劑盒檢測結(jié)果分析方法 ELISA試劑盒檢測結(jié)果分析方法:1、ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。2、平均OD值減去空白孔的OD值。3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來作圖,比如CurveExpert1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參發(fā)布時(shí)間:2023-09-18 16:22 點(diǎn)擊次數(shù):149 次
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影響培養(yǎng)基滅jun 效果的因素 影響培養(yǎng)基滅jun效果的因素:1、微生物種類:不同的微生物k值不同。2、初始菌量:在保持N值不變的前提下,t與初始菌量N0的對數(shù)成正比。3、培養(yǎng)基成份:油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。4、傳熱與混合狀況:影響受熱均勻度。5、培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。6、蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和滅jun溫度。7、pH:酸性pH下可加快微生物熱死速率發(fā)布時(shí)間:2023-09-11 11:13 點(diǎn)擊次數(shù):127 次
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LAMP試劑盒PCR反應(yīng)的特異性決定因素 PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;②堿基配對原則;③TaqDNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及TaqDNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。發(fā)布時(shí)間:2023-08-30 10:27 點(diǎn)擊次數(shù):117 次
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大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟要點(diǎn) 大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟要點(diǎn):1.加樣:①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差;②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。2.溫育:①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件;②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力發(fā)布時(shí)間:2023-08-22 15:02 點(diǎn)擊次數(shù):153 次
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ELISA包被條件選擇指南 1.包被抗原的選擇包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,對于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上,再通過特異性反應(yīng)使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,由于分子量太小,往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上,一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián),發(fā)布時(shí)間:2023-08-14 13:05 點(diǎn)擊次數(shù):128 次
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細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程 細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)zhi胎牛血清,10%。2、培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3、凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。二.細(xì)胞處理:1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴發(fā)布時(shí)間:2023-08-07 10:35 點(diǎn)擊次數(shù):126 次
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選擇合適一抗要點(diǎn) 選擇合適一抗要點(diǎn):1、確定抗體的名字,注意中英文名字、它名、亞型等信息。2、確定你的實(shí)驗(yàn)類型,Elisa,WB,IHC,ICC,還是FACS。一般抗體的說明書都會列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過適用于何種實(shí)驗(yàn)的類型,如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,請根據(jù)說明書列出的已驗(yàn)證的類型來選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體。3、確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬,Human,發(fā)布時(shí)間:2023-08-01 10:37 點(diǎn)擊次數(shù):129 次
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辨別胎牛血清的質(zhì)量外觀細(xì)節(jié) 胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛懷孕5-8個(gè)月時(shí),通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。牛血清作為實(shí)驗(yàn)室廣泛推崇的天然培養(yǎng)被應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)。胎牛血清含有胚胎發(fā)育所必需的生長因子。 胎牛血清因富含豐富的營養(yǎng)還有細(xì)胞**必須的成分所以大多時(shí)候用來培養(yǎng)干細(xì)胞等一些珍貴難養(yǎng)的細(xì)胞,某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,胎牛血清的珍貴導(dǎo)致它的價(jià)格也比其他的新生牛血清、小牛血清貴的多。所以學(xué)會如何辨別發(fā)布時(shí)間:2023-07-24 14:54 點(diǎn)擊次數(shù):133 次
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ELISA實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)條件選擇 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:1、固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。2、包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在發(fā)布時(shí)間:2023-07-19 11:20 點(diǎn)擊次數(shù):119 次
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小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞操作要點(diǎn) 小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞操作要點(diǎn):1、將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。2、將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝發(fā)布時(shí)間:2023-07-11 10:35 點(diǎn)擊次數(shù):237 次
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標(biāo)準(zhǔn)品的管理規(guī)范 標(biāo)準(zhǔn)品的管理規(guī)范:一、接收發(fā)布時(shí)間:2023-07-05 13:00 點(diǎn)擊次數(shù):169 次
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ELISA包被的方式 將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用力。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。發(fā)布時(shí)間:2023-06-28 10:14 點(diǎn)擊次數(shù):111 次
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大鼠ELISA試劑盒特點(diǎn)優(yōu)勢 大鼠ELISA試劑盒特點(diǎn)優(yōu)勢: 1.試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、an全性及經(jīng)濟(jì)性quan面評價(jià)。 2.靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。3.特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。4.精密度:ELISA試劑一般指其批發(fā)布時(shí)間:2023-06-14 10:44 點(diǎn)擊次數(shù):129 次
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ELISA樣本細(xì)胞提取液反復(fù)凍融方法 ELISA樣本細(xì)胞提取液反復(fù)凍融方法:1、吸出培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,用胰蛋白酶消化細(xì)胞,然后加入適量的培養(yǎng)基將培養(yǎng)板上的細(xì)胞沖洗干凈。懸浮細(xì)胞可以省略該步驟。2、將細(xì)胞懸浮液收集到離心管中,在2-8℃下以1000×g離心5分鐘,然后吸去培養(yǎng)基,用預(yù)冷PBS洗滌細(xì)胞3次。3、加入適量的預(yù)冷PBS(建議在使用前立即加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。在6孔培養(yǎng)板(約1×106個(gè)細(xì)胞)中,每個(gè)孔加入150-250μ發(fā)布時(shí)間:2023-06-06 10:41 點(diǎn)擊次數(shù):233 次
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ELISA 操作過程注意事項(xiàng) ELISA操作過程注意事項(xiàng):1、操作前應(yīng)對實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。3、手工洗板加洗液時(shí)發(fā)布時(shí)間:2023-05-29 11:19 點(diǎn)擊次數(shù):137 次