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  • PCR反應(yīng)被抑制或效率較低調(diào)整過程 PCR反應(yīng)被抑制或效率較低調(diào)整過程:一旦確定反應(yīng)被抑制或效率較低，則可采取一些步驟將效率值重新調(diào)整到理想范圍內(nèi)。1、對于抑制作用，可去除模板濃度高的反應(yīng)孔并重新分析標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果效率重新回到110%以下，則分析良好。2、另一種解決方案是重新純化模板。切記應(yīng)延長干燥時間，以去除乙醇沉淀過程中的乙醇，或采用另外的柱上洗滌液將離液鹽從硅膠純化物中去除。3、通過分析優(yōu)化可解決效率低下的問題。此過程有時相對
    發(fā)布時間：2024-10-28 16:15 點擊次數(shù)：5 次
  • 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用管理說明 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一般是指一種確定了具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料，作為分析測量行業(yè)中的“量具'，在校準(zhǔn)測量儀器和裝置、評價測量分析方法、測量物質(zhì)或材料特性值和考核分析人員的操作技術(shù)水平，以及在過程中產(chǎn)品的質(zhì)量控制等領(lǐng)域起著*的作用。企業(yè)或?qū)嶒炇覒?yīng)當(dāng)建立標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的科學(xué)管理制度，以保證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)全流程的可追溯性、使信息傳遞正確有效，保證流轉(zhuǎn)過程數(shù)量和貯存準(zhǔn)確、讓使用更規(guī)范與合理。一、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來源合
    發(fā)布時間：2024-10-23 17:01 點擊次數(shù)：15 次
  • ELISA實驗洗滌過程操作技巧小結(jié) 聚苯乙烯因其具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA實驗的固相載體，聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，因此需要通過洗滌**在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻決定著實驗的成敗。上述提到的血清中存在紅細(xì)胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時得到控制，同樣也可以通過適當(dāng)增加洗滌次數(shù)和浸泡時間減輕或避免對實驗結(jié)果的影響，同樣，對于血
    發(fā)布時間：2024-10-16 14:35 點擊次數(shù)：23 次
  • 細(xì)胞培養(yǎng)操作 細(xì)胞培養(yǎng)操作：1)復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000rpm條件下離心3min，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第2天換液并檢查細(xì)胞密度。2)細(xì)胞傳代
    發(fā)布時間：2024-10-12 16:08 點擊次數(shù)：23 次
  • 檢測試劑盒保存方法 檢測試劑盒保存方法:1.檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗刷液可能會有結(jié)晶分出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗刷時不影響成果。3.各步加樣均應(yīng)運用加樣器，并常常校正其準(zhǔn)確性，以防止試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，引薦運用排槍加樣。4.請每次測定的一起做規(guī)范曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高
    發(fā)布時間：2024-10-06 10:20 點擊次數(shù)：41 次
  • 實時熒光定量PCR使用的熒光物質(zhì)原理簡述 實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料?，F(xiàn)將其原理簡述如下：1.TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可
    發(fā)布時間：2024-09-30 10:15 點擊次數(shù)：51 次
  • 從外觀和性能上篩選血清分析 在實際篩選時，主要從血清外觀和實驗操作時細(xì)胞的生長狀態(tài)進行。從外觀上：1.顏色：根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點溶血，因為胎牛血清凝血功能差，紅細(xì)胞容易破裂；2.澄清度：高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡；3.血清沉淀：血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對血清質(zhì)量沒有影響，沉淀的
    發(fā)布時間：2024-09-23 10:23 點擊次數(shù)：53 次
  • 生化試劑的技術(shù)分類陳述 生化試劑的技術(shù)分類:1.生化分離與分析技術(shù)光譜技術(shù)已從單一的比色法發(fā)展為采用分光光度法、透射比濁法、原子吸收和火焰發(fā)射光譜法、分子熒光光譜法。分離技術(shù)除了一般的離心和超離心技術(shù)外，還有層析技術(shù)和電泳技術(shù)。層析技術(shù)包括薄層層析、凝膠層析、離心交換層析、親和層析、氣相層析、高效液相色譜（HPLC）等等。電泳技術(shù)中紙電泳、醋酸纖維膜電泳的應(yīng)用已明顯減少，瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAG）應(yīng)用增多，
    發(fā)布時間：2024-09-14 15:18 點擊次數(shù)：64 次
  • ELISA試劑盒主要操作步驟技巧 ELISA試劑盒主要操作步驟技巧：1加樣：①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。2.溫育：①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度
    發(fā)布時間：2024-09-09 10:03 點擊次數(shù)：81 次
  • 小鼠血管舒緩激肽（BK）ELISA試劑盒實驗包被和封閉的原理 ELISA包被和封閉的原理：實驗時，需要將抗原或捕獲抗體包被于固相載體上，通過檢測分子（酶或熒光基團），將化學(xué)信號轉(zhuǎn)換為電信號，以O(shè)D值或發(fā)光值的結(jié)果，對靶蛋白進行定量分析。ELISA中的固相載體物很多，常用的是聚苯乙烯，具有較強的蛋白質(zhì)吸附性。具有可制成各種形式，且不參與化學(xué)反應(yīng)的特點。與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯，它質(zhì)軟板薄，可切割，價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比
    發(fā)布時間：2024-09-03 11:02 點擊次數(shù)：91 次
  • 大腸桿菌PCR檢測試劑盒PCR引物二聚體減除方法 大腸桿菌PCR檢測試劑盒PCR引物二聚體減除方法：如果出現(xiàn)了引物二聚體，有許多方法可以減少或消除反應(yīng)中的引物二聚體。1、首先是優(yōu)化熱循環(huán)條件，這主要是提高退火溫度。大多數(shù)情況下，兩步循環(huán)(由95°C變性步驟直接進入60°C退火和延伸步驟)有利于強效擴增，因此引物設(shè)計時設(shè)定的成功退火溫度為60°C。2、可降低引物濃度，甚至采用不同的正向引物和反向引物的比值也有一定的幫助。大多數(shù)情況下，每條引物的理想
    發(fā)布時間：2024-08-27 10:24 點擊次數(shù)：78 次
  • 鑒定ELISA試劑盒方法分析 鑒定ELISA試劑盒方法：鑒別方法：Ⅰ：利用干擾實驗即可辨別elisa試劑盒是否檢測目的抗原，方法如下：（1）將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody:antigen≈1:2的混合孵育液（2）37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體（3）后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物（4）實驗完畢后，檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的
    發(fā)布時間：2024-08-19 14:07 點擊次數(shù)：94 次
  • PCR反應(yīng)條件的選擇技巧 PCR反應(yīng)條件的選擇技巧主要體現(xiàn)在溫度、時間和循環(huán)次數(shù)上，溫度過高，延伸時間不夠都會對實驗結(jié)果有很大的影響。PCR反應(yīng)條件三要素為溫度、時間和循環(huán)次數(shù)。溫度與時間的設(shè)置基于PCR原理三步驟而設(shè)置變性-退火-延伸三個溫度點。在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)中采用三溫度點法，雙鏈DNA在90～95℃變性，再迅速冷卻至40～60℃，引物退火并結(jié)合到靶序列上，然后快速升溫至70～75℃，在TaqDNA 聚合酶的作用下，使引
    發(fā)布時間：2024-08-16 13:43 點擊次數(shù)：96 次
  • ELISA檢測試劑盒實驗加樣流程 ELISA檢測試劑盒實驗加樣流程：1、標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。2、加樣后及時放入孵箱。 3、加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。4、如果采用
    發(fā)布時間：2024-08-13 10:38 點擊次數(shù)：101 次
  • 細(xì)胞復(fù)蘇過程 細(xì)胞復(fù)蘇是指將凍存在液氮里邊或者-80℃冰箱中的細(xì)胞解凍，再培養(yǎng)傳代。細(xì)胞復(fù)蘇應(yīng)采用快速融化的方法，這樣的目的是為了讓細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)融化，從而避免慢悠悠的融化，使得水分滲入細(xì)胞內(nèi)再結(jié)晶，從而對細(xì)胞再次造成傷害，從而影響細(xì)胞的存活率。細(xì)胞復(fù)蘇：1：細(xì)胞是凍在-80℃的環(huán)境里面的，所以拿出來后，應(yīng)該盡快去37℃水浴鍋里解凍（我一般是放在PE手套里面，然后在37攝氏度的水域上快速融化。
    發(fā)布時間：2024-08-06 10:12 點擊次數(shù)：99 次
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