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產(chǎn)品名稱：人腎癌細胞+luc;A498-LUC-PURO
產(chǎn)品型號：P-X11296
產(chǎn)品**：派瑞曼
產(chǎn)品價格：0
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簡單介紹：

人腎癌細胞+luc;A498-LUC-PURO公司正在出售的產(chǎn)品：SNU-80細胞磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 OVA sIgG ELISA Kit 卵清蛋白特異性定量elisa kit 連接粘附分子C抗體 SCL-1（皮膚鱗癌細胞）

詳情介紹：

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

人腎癌細胞+luc;A498-LUC-PURO

英文簡稱

規(guī)格

貨號

A498-LUC-PURO

1×106

P-X11296

產(chǎn)品詳情：

細胞別稱；A498-LUC-PURO；人腎透明細胞癌-株熒光素酶標記；人腎透明細胞癌-LUC-PURO

種屬來源；人

組織來源；腎

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

背景簡介；Luciferase A498細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時不需要添加維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。A-498細胞是由Aaronson·S建立，源自一位52歲患有腎癌的女性病人。

生物等級；1

細胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

保藏機構(gòu)；ATCC; CRL-7908 ATCC; HTB-44 DSMZ; ACC-55

培養(yǎng)基；MEM+10% FBS+PS+1. 0ug/ml puro

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細胞處理：

1）凍存細胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實驗原理：

公司正在出售的產(chǎn)品：

γ干擾素(IFNG)elisa生化檢測試劑盒

血糖含量測試盒

IFNG ELISA kit

人chemerin elisa檢測試劑盒免費代測

人蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗體elisa生化檢測試劑盒

全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP完全間接檢測試劑盒（含一抗和AP二抗）

HumanTyrosinePhosphataseAutoantibodiesELISAKit

大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)elisa檢測試劑盒

二氫黃酮醇還原酶（DFR）測試盒

小鼠高遷移率族蛋白1(HMGB1)elisa檢測試劑盒

細胞CASPASE-1蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶LMTK3抗體 LMTK3

小鼠FAM172A蛋白(FAM172A)elisa檢測試劑盒

絲裂原誘導(dǎo)蛋白2抗體 Kindlin 2

果糖-1,6-二磷酸醛縮酶（FDA）測試盒

PE標記人/小鼠CD11b單克隆抗體 human/mouse CD11b/PE

肌鈣蛋白C2抗體 TNNC2

PE標記小鼠H-2Dk單克隆抗體 mouse H-2Dk/PE

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接蛋白1抗體 STAM

14-3-3E蛋白重組兔單克隆抗體 14-3-3 epsilon

血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 Von Willebrand Factor

1號染色體開放閱讀框43抗體 C1orf43

膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體 CETP

環(huán)指蛋白211抗體 RNF211

蛋白磷酸酶PPP1R11抗體 PPP1R11

FBXL8蛋白抗體 FBXL8

FAM155A蛋白抗體 FAM155A

人腎癌細胞+luc;A498-LUC-PURO磷酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體 phospho-HP1 alpha (Ser92)

貓眼綜合征染色體候選基因2抗體 CECR2

細胞AKT蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒

鮭魚elisa分析檢測試劑盒

小鼠CD45分子(CD45)elisa分析檢測試劑盒

實驗步驟：

1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細胞進行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進行細胞鋪板，轉(zhuǎn)染時細胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。

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