產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:人胚腎細(xì)胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro

  • 產(chǎn)品型號:P-X11288
  • 產(chǎn)品廠商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品價格:0
  • 折扣價格:0
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簡單介紹:
人胚腎細(xì)胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro公司正在出售的產(chǎn)品:SNU-8細(xì)胞 囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體 MMP-9 ELISA Kit 基質(zhì)金屬蛋白酶定量elisa kit 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 SCC-25口腔鱗癌細(xì)胞
詳情介紹:

人胚腎細(xì)胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro

英文名稱

HEK293-copGFP-puro

產(chǎn)品形態(tài)

上皮細(xì)胞樣 貼壁生長

貨號

P-X11288

產(chǎn)品分類

規(guī)格

1×106

包裝

來源

胚胎腎

用途

僅供科研研究使用

細(xì)胞特性:

細(xì)胞別稱;HEK293-copGFP-puro;人胚腎細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;人胚腎細(xì)胞-copGFP-puro

種屬來源;人

組織來源;胚胎腎

生長特性;貼壁生長

細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù);p3-p8

背景簡介;Luciferase HEK-293細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢光蛋白。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加維持。可用作螢光蛋白活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。 HEK-293細(xì)胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,HEK-293細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報道中指出,293 HEK-293細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad51-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。

生物等級;2

細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測;無

保藏機構(gòu);90% DMEM+10% FBS+PS+1. 0ug/ml puro

培養(yǎng)基;ATCC; CRL-1573 ATCC PTA-4488 DSMZ ACC-305 ECACC 85120602

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存

 

運輸和保存:

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。



細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。                      
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備MEM(推薦iCell-0012)培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1 mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min,棄去上清液,加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6 cm 皿中,加入約 4 mL 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,棄去 消化液,將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細(xì)胞消化情況而定) ,然后在顯微鏡下 觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞,裝入無菌離心管中,1000 rpm 條件下離心 4 min,棄去上清液, 用 PBS 清洗一遍,棄盡 PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度 5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍 存管凍存 1mL 細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項:

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。 
9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:

黃體生成素(LH)elisa生化檢測試劑盒

人骨涎蛋白(BSP)elisa分析檢測試劑盒

LH ELISA Kit

大鼠白介素6受體(IL6R)elisa檢測試劑盒

人蛋白激酶C(PKC)elisa生化檢測試劑盒

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)elisa檢測試劑盒

PKCELISAKit

冰凍切片琥珀酸脫氫酶活性染色試劑盒

大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)elisa檢測試劑盒

ELISAelisa檢測試劑盒

小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa分析檢測試劑盒

水通道蛋白-3抗體 AQP3

L-苯丙氨酸解氨酶(PALelisa檢測試劑盒

絲氨酸蘇氨酸激酶1受體相互作用蛋白抗體 RIPK1

組織PAR1Bα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

Pellino 1蛋白抗體 Pellino 1

活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體 ATF6

PE標(biāo)記人HLA-DR單克隆抗體 human HLA-DR/PE

新朊蛋白抗體 SPRN

組織相容性抗原DQA2抗體 HLA-DQA2

嗅覺受體5H6抗體 OR5H6

1號染色體開放閱讀框114抗體 C1orf114

大腦蛋白1抗體 POU3F3

環(huán)辛四烯小鼠單抗 COT

蛋白激酶受體相關(guān)1β抗體 PKA regulatory subunit I beta

FAM98A蛋白抗體 FAM98A

EXOSC9蛋白抗體 Exosome Component 9

人胚腎細(xì)胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro磷酸化細(xì)胞周期檢測點激酶2抗體 Phospho-CHEK2 (Thr68)

磷酸脂磷酸水解酶1抗體 PPAP2A

小鼠γ干擾素受體(IFN-γR)elisa分析檢測試劑盒

琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒

大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)elisa檢測試劑盒


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