產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:人骨肉瘤細胞+LUC;U20S-LUC-PURO

  • 產(chǎn)品型號:P-X11286
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品價格:0
  • 折扣價格:0
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簡單介紹:
人骨肉瘤細胞+LUC;U20S-LUC-PURO公司正在出售的產(chǎn)品:SNU-C2A直腸癌細胞 皮膚T細胞虜獲趨化因子抗體 CALU ELISA Kit 鈣腔蛋白定量elisa kit 膜相關(guān)磷脂轉(zhuǎn)運蛋白抗體 SCaBER膀胱鱗癌細胞
詳情介紹:

運輸和保存:

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

人骨肉瘤細胞+LUC;U20S-LUC-PURO

英文名稱

U2OS-LUC-PURO

產(chǎn)品形態(tài)

上皮細胞樣 貼壁生長

貨號

P-X11286

產(chǎn)品分類

規(guī)格

1×106

包裝

來源

用途

僅供科研研究使用

細胞特性:

細胞別稱;U2OS-LUC-PURO;人骨肉瘤細胞株-熒光素酶標記;人骨肉瘤細胞株-LUC-PURO

種屬來源;人

組織來源;骨

生長特性;貼壁生長

細胞形態(tài);上皮細胞樣

背景簡介;Luciferase U-2 OS細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。U-2OS細胞(原名2T)是由Ponten·JSaksela·E1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。U-2 OS細胞與WI-38細胞共培養(yǎng)或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補體結(jié)合試驗(CF)未檢測到病毒。U-2 OS細胞表達胰島素樣生長因子III(IGF-I、IGF-II)受體和骨肉瘤衍生生長因子(ODGF)。

生物等級;1

細胞規(guī)格;1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測;無

保藏機構(gòu);ATCC; HTB-96 DSMZ; ACC-785 ECACC; 92022711

培養(yǎng)基;McCoy's 5A10% FBS1% PS+1. 0ug/ml puro

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存


細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。                      
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM(推薦iCell-0012)培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、細胞培養(yǎng)操作:

1) 復蘇細胞:將含有 1 mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min,棄去上清液,加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或?qū)⒓毎麘乙杭尤?6 cm 皿中,加入約 4 mL 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去 消化液,將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細胞消化情況而定) ,然后在顯微鏡下 觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞,裝入無菌離心管中,1000 rpm 條件下離心 4 min,棄去上清液, 用 PBS 清洗一遍,棄盡 PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度 5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍 存管凍存 1mL 細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品:

睪酮(T)elisa生化檢測試劑盒

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子-β2TGF-β2elisa檢測試劑盒

T ELISA kit

B細胞瘤-XL(Bcl-xl)elisa分析檢測試劑盒

人蛋白激酶B(PKB)elisa生化檢測試劑盒

CDKN2A基因甲基化程度定量分析試劑盒

PKBELISAKit

大鼠左右決定因子1(LEFTY1)elisa檢測試劑盒

大鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PCP)elisa分析檢測試劑盒

小鼠封閉蛋白3(CLDN3)elisa檢測試劑盒

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水通道蛋白1抗體 AQP1

蘆丁含量測試盒

絲氨酸甲基化酶mSHMT抗體 SHMT2

胞漿甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSH ST)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒

PEG3蛋白抗體 PEG3

活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體 ATF5

PE標記人CD9單克隆抗體 human CD9/PE

鋅轉(zhuǎn)運體8抗體 ZNT8

組織相容性抗原DQA1抗體 HLA-DQA1

嗅覺受體5H1抗體 OR5H1

1號染色體開放閱讀框111抗體 C1ORF111

單克隆抗體 Marijuana(2B1)

環(huán)腺苷酸應答元件結(jié)合蛋白樣蛋白2抗體 CREBL2

蛋白激酶錨定蛋白抗體 Neurobeachin

FAM96A蛋白抗體 FAM96A

EXOSC6蛋白抗體 EXOSC6

人骨肉瘤細胞+LUC;U20S-LUC-PURO磷酸化細胞質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體 phospho-Caveolin-2 (Tyr19)

卵黃狀黃斑病蛋白抗體 Bestrophin

CDK4蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒

乙醛脫氫酶ALDH活性測試盒 50/48樣 比色法

小鼠Ⅳ型膠原(Col )elisa檢測試劑盒

三、培養(yǎng)注意事項:

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。 
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細胞僅供科研使用。 
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。 
9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。



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