產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:神經(jīng)外胚層腫瘤細胞;TC-71

  • 產(chǎn)品型號:P-X11212
  • 產(chǎn)品廠商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品價格:0
  • 折扣價格:0
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簡單介紹:
神經(jīng)外胚層腫瘤細胞;TC-71公司正在出售的產(chǎn)品:SW480結(jié)腸癌細胞 Fas相互作用蛋白激酶3抗體 GIF ELISA Kit 胃內(nèi)因子定量elisa kit CTBS蛋白抗體 RC-K8細胞
詳情介紹:

細胞接收后的處理:


1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。

神經(jīng)外胚層腫瘤細胞;TC-71


英文簡稱

規(guī)格

貨號

TC71

1×106

P-X11212

產(chǎn)品詳情:


細胞別稱;TC71 TC-71;神經(jīng)外胚層腫瘤細胞

種屬來源;人

組織來源;神經(jīng)外胚層

生長特性;貼壁生長

細胞形態(tài);上皮細胞樣

細胞代數(shù);10代以內(nèi)

細胞規(guī)格;1x106cells/T251mL凍存管

支原體檢測;無

培養(yǎng)基;RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細胞處理:

1)凍存細胞的復(fù)蘇::將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例:
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實驗原理:


公司正在出售的產(chǎn)品:

魚脫氫表雄酮(DHEA)elisa生化檢測試劑盒

大鼠總膽汁酸(TBA)elisa檢測試劑盒

DHEA ELISA Kit

大量(文庫)酵母細胞完全轉(zhuǎn)化試劑盒

人成纖維細胞生長因子23(FGF-23)elisa生化檢測試劑盒

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FGF-23ELISAKit

魚黃體生成素(LH)elisa分析檢測試劑盒

血液高效液相色譜法定量檢測試劑盒

大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)elisa檢測試劑盒

瑞氏染色液(即用型)500ml

腎細胞癌抗原NYREN 45抗體 KCTD3

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嗜酸乳桿菌假定蛋白 Lactobacillus acidophilus hypothetical protein

PCR擴增檢測試劑盒

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黑色素瘤相關(guān)抗原C1抗體 MAGEC1

PE-Cy5標(biāo)記人CD107a單克隆抗體 human CD107b/PE-Cy5

鋅指蛋白516抗體 ZNF516

轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MTA3抗體 MTA3

鋅指蛋白826抗體 ZNF826

組蛋白賴氨酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶2B抗體 KMT2B

層粘蛋白α1抗體 Laminin alpha 1

核酸內(nèi)切酶8樣蛋白2抗體 NEIL2

雌調(diào)節(jié)基因1抗體 CUZD1

eIF4E結(jié)合蛋白抗體 eIF4EBP1

DOCK9蛋白抗體 DOCK9

神經(jīng)外胚層腫瘤細胞;TC-71磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2抗體 phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594)

磷酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 phospho-MYBL2 (Thr487)

P-選擇素糖蛋白配體1PSGL-1elisa檢測試劑盒

酵母多酚氧化酶(polyphenol oxidase;PPO)活性比色法定量檢測試劑盒

大鼠β防御素(β-Defensinelisa檢測試劑盒

實驗步驟:


1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細胞進行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進行細胞鋪板,轉(zhuǎn)染時細胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。


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