公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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A375-EGFP細(xì)胞
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詳見說明書
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FS-X5419
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產(chǎn)品名稱：惡性黑色素瘤細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺(tái)；
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
異去蟛蜞菊內(nèi)酯英文名稱： DL-Alanine肝生長因子激活蛋白抗體包裝5g
異去氫鉤藤堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Tyrosine肝癌衍生生長因子抗體（高遷移率族蛋白1樣蛋白2抗體）包裝100g
異珊瑚菜素英文名稱： DL-Methionine磷酸化組蛋白H3抗體包裝25g
異鼠李素(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Aspartic acid核糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體包裝5g
異鼠李素-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Glutamine乙?；M蛋白H3抗體包裝1g
異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Proline乙酰化和磷酸化組蛋白H3抗體包裝5g
異鼠李素-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： DL-Alanine methyl ester hydrochloride組蛋白H2A抗體包裝1g
異鼠李素-3-O-新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： H-Glu(OEt)-OH乙?；M蛋白H2A抗體包裝5g
異飛薊賓英文名稱： N-Acetyl-DL-leucine 乙?；M蛋白H2B抗體包裝1g
異土木香內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N6-Cbz-L-Lysine乙?；M蛋白H2B抗體包裝1mg
異夏佛塔苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Esmolol HCl磷酸化組蛋白H2AX抗體包裝10g
異型南五味子丁素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Esmolol HCl磷酸化熱休克蛋白27抗體包裝100g
異櫻花素;異櫻花亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： H-Met-OtBu·HCl磷酸化熱休克蛋白70抗體包裝25g
異澤蘭黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Maltitol 磷酸化熱休克因子1抗體包裝500g
異紫花前胡內(nèi)酯英文名稱： L-Threonine methyl ester hydrochloride磷酸化熱休克因子1抗體包裝5g
A375-EGFP細(xì)胞科氏葡萄球菌科氏亞種Human PRDX6(Peroxiredoxin-6) ELISA KitAlias: PRDX6|aiPLA2|AOP2|NSGPx|1-Cys|24kDaprotein|Acidiccalcium-independentphospholipaseA2|aiPLA21-CysPRX|Antioxidantprotein2|Non-seleniumglutathioneperoxidase|Redbloodcellspagespot12|Liver2Dpagespot40|NSGPx1-Cysperoxiredoxin|p29|peroxiredoxin6|PRXELISAKitReactivity: Human
水生哈薩克斯坦酵母Human TTN(Titin) ELISA KitAlias: TTN|Titin|Connectin|RhabdomyosarcomaantigenMU-RMS-40.14|CMD1G|CMH9|CMPD4|EOMFC|HMERF|LGMD2J|MYLK5|TMDELISAKitReactivity: Human
美味牛肝菌Human FSCN1(Fascin) ELISA KitAlias: Fascin|FSCN1|FAN1|HSN|Singed-likeProtein|SNL|FAN1|55kDaactin-bundlingprotein|fascinhomolog1|actin-bundlingprotein(StrongylocentrotuspurpuRatus)|p55|actinbundlingprotein|singed(Drosophila)-like(seaurchinfascinhomologlike)|singed-like(fascinhomolog|seaurchin)|Singed-likeproteinELISAKitReactivity: Human
大腸埃希氏菌Human TPI1(Triosephosphate isomerase) ELISA KitAlias: TIM(Triosephosphateisomerase)|TPI1|TPI|Triose-phosphateisomeraseELISAKitReactivity: Human
爪哇根霉Human RNASE3/ECP(Ribonuclease A3/Eosinophil Cationic Protein) ELISA KitAlias: RNASE3|ECP(RibonucleaseA3|EosinophilCationicProtein)ELISAKitReactivity: Human
鏈格孢Human PDXK(Pyridoxal kinase) ELISA KitAlias: PDXK|Pyridoxalkinase|Pyridoxinekinase|PRED79|C21orf124|C21orf97|PKH|PNK|VitaminB6Kinase|HEL-S-1aELISAKitReactivity: Human
枯草芽胞桿菌Human POMGNT1(Protein O-linked-mannose beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase 1) ELISA KitAlias: POMGNT1|ProteinO-linked-mannosebeta-1|2-N-acetylglucosaminyltransferase1|POMGnT1|UDP-GlcNAc:alpha-D-mannosidebeta-1|2-N-acetylglucosaminyltransferaseI.2|GnTI.2|MDDGA3|MDDGB3|MDDGC3|MEB|MGAT1.2ELISAKitReactivity: Human
刺囊毛霉Human HMGCS1(Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, cytoplasmic) ELISA KitAlias: HMGCS1(Hydroxymethylglutaryl-CoAsynthase|cytoplasmic)|HMG-CoAsynthase|HMGCS|3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzymeAsynthaseELISAKitReactivity: Human