AV3細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：宮頸癌細(xì)胞

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

止瀉木子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： H-Pyr-OH人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病膜糖蛋白2抗體包裝5g

枳殼（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Z-Pyr-OHBeta氨基己糖苷酶beta亞基蛋白B鏈抗體包裝1g

枳實（酸橙）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-m-TyrosineHEXIM2蛋白抗體包裝250mg

制何首烏（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： H-Sar-OMe·HCl3'-5'外切酶1蛋白抗體包裝10g

腫節(jié)風(fēng)（草珊瑚）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Isoleucinol型肝炎病NS5B抗體包裝100g

重樓(云南重樓)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Leucinol缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體包裝25g

重樓皂苷II（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Boc-LeucinolHEG同源蛋白1抗體包裝500g

重樓皂苷I（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Phenylalaninol人腫瘤抑制蛋白抗體包裝1g

重樓皂苷VII（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-TryptophanolHemk基轉(zhuǎn)移酶家族1號蛋白抗體包裝5g

重樓皂苷VI（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fmoc-ValinolHemk基轉(zhuǎn)移酶家族2號蛋白抗體包裝1g

珠子草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-ValinolHEN1基轉(zhuǎn)移酶同源蛋白1抗體包裝250mg

豬膽粉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Phenylglycinol缺氧誘導(dǎo)基因2蛋白抗體包裝5g

豬苓酸C英文名稱： BOC-L-Prolinol乙肝病衣殼蛋白抗體包裝25g

豬去氧膽酸（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-Amino-1,3-propanediol 型肝炎病1a基因型NS5蛋白抗體包裝5g

豬牙皂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N-Methyl-d-Aspartic Acid戊型肝炎病抗體包裝50g
AV3細(xì)胞圍小叢殼菌Human SFTPB(Pulmonary surfactant-associated protein B) ELISA KitAlias: SPB(PulmonarySurfactantAssociatedProteinB)|SFTPB|SP-B|SFTP3|Pulmonarysurfactant-associatedproteolipidSPL(Phe)|18kDapulmonary-surfactantprotein|6kDaproteinELISAKitReactivity: Human

粉色小菇Human PLA2G4A(Cytosolic phospholipase A2) ELISA KitAlias: cPLA2|PLA2G4A(CytosolicphospholipaseA2)|cPLA2-alpha|calcium-dependentphospholipid-bindingprotein|lysophospholipase|phosphatidylcholine2-acylhydrolase|PhospholipaseA2groupIVA|phospholipaseA2|groupIVA(cytosolic|calcium-dependent)ELISAKitReactivity: Human

楚科奇?？凭S爾氏菌Human SFTPC(Pulmonary surfactant-associated protein C) ELISA KitAlias: SPC(PulmonarySurfactantAssociatedProteinC)|SFTPC|SFTP2|SP-C|SP5|Pulmonarysurfactant-associatedproteolipidSPL(Val)ELISAKitReactivity: Human

豬鏈球菌II型Human NDUFS8(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 8, mitochondrial) ELISA KitAlias: NDUFS8|NADHdehydrogenase[ubiquinone]iron-sulfurprotein8|mitochondrial|TYKYsubunit|ComplexI-23kD|CI-23kD|NADH-ubiquinoneoxidoreductase23kDasubunit|TYKY|CI-23k|CI23KDELISAKitReactivity: Human

未定德研所菌Human PRAP1(Proline-rich acidic protein 1) ELISA KitAlias: PRAP1(Proline-richacidicprotein1)|Uterine-specificproline-richacidicprotein|Uterine-specificproline-richacidicproteinELISAKitReactivity: Human

黑腐皮殼屬Human SDCCAG3(Serologically defined colon cancer antigen 3) ELISA KitAlias: SDCCAG3(Serologicallydefinedcoloncancerantigen3)|AntigenNY-CO-3ELISAKitReactivity: Human

弗氏檸檬酸桿菌Human NDUFS7(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 7, mitochondrial) ELISA KitAlias: NDUFS7|NADHdehydrogenase[ubiquinone]iron-sulfurprotein7|mitochondrial|PSSTsubunit|ComplexI-20kD|CI-20kD|NADH-ubiquinoneoxidoreductase20kDasubunit|PSST|CI-20|MY017ELISAKitReactivity: Human

釀酒酵母Human CXCL14(C-X-C motif chemokine 14) ELISA KitAlias: CXCL14|C-X-Cmotifchemokine14|Small-induciblecytokineB14|ChemokineBRAK|MIP-2G|UNQ240|PRO273|PSEC0212|MIP2G|NJAC|SCYB14ELISAKitReactivity: Human