產(chǎn)品名稱:膽囊癌細(xì)胞
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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NOZ細(xì)胞
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詳見說明書
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FS-X5484
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實(shí)驗效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
甘草酸單銨鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deoxyshikonin離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝1g
甘草酸二銨鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tariquidar,XR-9576高分子量激肽原重鏈抗體包裝250mg
甘草異黃酮A英文名稱: Titan yellow通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體包裝25g
甘木通(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SasapyrineKelch樣蛋白26抗體包裝5g
甘青青蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sasapyrine賴氨酸,天冬氨酸,谷氨酸,亮氨酸相關(guān)序列抗體包裝25g
甘松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lurasidone HClKelch樣蛋白10抗體包裝5g
甘遂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lurasidone HClKelch樣蛋白11抗體包裝25MG
甘西鼠尾草酸英文名稱: PrunetinKelch樣蛋白3抗體包裝100g
甘油三油酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aromadendrin(Dihydrokaempferol)Kelch樣蛋白14抗體包裝25g
苷松新酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3',4',7-TrihydroxyflavoneKelch樣蛋白31抗體包裝5g
橄欖苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DiclazurilKelch樣蛋白32抗體包裝1g
崗梅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Metacycline HCl;Methacycline HCl電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體包裝250mg
崗松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Metacycline HCl;Methacycline HClTGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體包裝5g
杠柳次苷英文名稱: Adipic dihydrazide離子通道蛋白Kv1.3抗體包裝25g
杠柳苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Linolenic acid磷酸化KLF5抗體包裝5g
NOZ細(xì)胞枯草芽孢桿菌Human SERBP1 (Plasminogen activator inhibitor 1 RNA-binding protein) ELISA KITAlias: SERBP1ELISAKitReactivity: Human
玉蜀黍赤霉Human CAPN15 (Calpain-15) ELISA KITAlias: CAPN15ELISAKitReactivity: Human
毛柄菌(金針菇)Human SGIP1 (SH3-containing GRB2-like protein 3-interacting protein 1) ELISA KITAlias: SGIP1ELISAKitReactivity: Human
錐形赤褶菇2-3Human SH3BP5L (SH3 domain-binding protein 5-like) ELISA KITAlias: SH3BP5LELISAKitReactivity: Human
威氏芽孢桿菌Human SETX (Probable helicase senataxin) ELISA KITAlias: SETXELISAKitReactivity: Human
豬丹毒絲菌Human SHCBP1 (SHC SH2 domain-binding protein 1) ELISA KITAlias: SHCBP1ELISAKitReactivity: Human
枯草芽胞桿菌Human SAV1 (Protein salvador homolog 1) ELISA KITAlias: SAV1ELISAKitReactivity: Human
希爾青霉Human IREB2(Iron-responsive element-binding protein 2) ELISA KitAlias: IREB2|IRE-BP2|IRP2|Ironregulatoryprotein2ELISAKitReactivity: Human