實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
CTLA4IG-24細胞
詳見說明書
FS-X5548
產(chǎn)品名稱:中國倉鼠卵巢細胞
公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
羌活(寬葉羌活)(標準品)英文名稱: PhlorizinMPP2蛋白抗體包裝25g
羌活(標準品)英文名稱: Phloretin發(fā)育相關(guān)蛋白抗體包裝5g
羌活(標準品)英文名稱: PhloretinMS4A15蛋白抗體包裝1g
羥基紅花黃色素A(標準品)英文名稱: Rhyncholphylline四度跨膜蛋白3抗體包裝250mg
羥基積雪草苷(標準品)英文名稱: β-Sitosterol黑色素瘤相關(guān)抗原12抗體包裝5g
羥基積雪草酸(標準品)英文名稱: Glabridin黑色素瘤相關(guān)抗原2抗體包裝100MG
羥基酪;3,4-二羥基苯乙(標準品)英文名稱: Podophyllotoxin黑色素瘤相關(guān)抗原5抗體包裝10MG
羥基茜草素/紅紫素(標準品)英文名稱: Podophyllotoxin同源盒基因Msx2抗體包裝1g
喬松素(標準品)英文名稱: Podophyllotoxin磷酸化雙微體2癌基因抗體包裝5g
茄尼(標準品)英文名稱: D-Fructose磷酸化雙微體2癌基因抗體包裝100ml
芹菜苷; 芹黃苷(標準品)英文名稱: Fructose三聚單克隆抗體包裝25ml
芹菜素(標準品)英文名稱: Harpagoside黑色素瘤相關(guān)抗原B1抗體包裝1ml
芹菜素-6-C-α-L-吡喃阿拉伯糖-8-C-β-D-...英文名稱: Harpagide微小染色體維持缺陷蛋白5抗體包裝25g
芹菜素-7-O-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷英文名稱: Sec-O-Glucosylhamaudol結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
褐囊蜜環(huán)菌Human LTBP4 (Latent-transforming growth factor beta-binding protein 4) ELISA KITAlias: LTBP4ELISAKitReactivity: Human
野土地桿菌Human KDELC1 (KDEL motif-containing protein 1) ELISA KITAlias: KDELC1ELISAKitReactivity: Human
釀酒酵母Human INIP (SOSS complex subunit C) ELISA KITAlias: INIPELISAKitReactivity: Human
不產(chǎn)色鏈霉菌不產(chǎn)色亞種Human IQUB (IQ and ubiquitin-like domain-containing protein) ELISA KITAlias: IQUBELISAKitReactivity: Human
釀酒酵母Human TTPA(Alpha-tocopherol transfer protein) ELISA KitAlias: TTPA|Alpha-tocopheroltransferprotein|Alpha-TTP|TPP1ELISAKitReactivity: Human
噬果膠黃桿菌Human ISOC2 (Isochorismatase domain-containing protein 2) ELISA KITAlias: ISOC2ELISAKitReactivity: Human
地衣芽孢桿菌Human ICA1(Islet cell autoantigen 1) ELISA KitAlias: ICA1ELISAKitReactivity: Human
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、50ml離心筒2個
茜素雙酯(標準品)英文名稱: Phlorizin絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白1抗體包裝100g
CTLA4IG-24細胞長蠕孢Human FTMT(Ferritin, mitochondrial) ELISA KitAlias: FTMT|Ferritin|mitochondrialELISAKitReactivity: Human
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
2.如有必要,請您留下您的詳細聯(lián)系方式!
- 溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買前務必確認供應商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
- 免責申明:以上內(nèi)容為注冊會員自行發(fā)布,若信息的真實性、合法性存在爭議,平臺將會監(jiān)督協(xié)助處理,歡迎舉報